接種是食用菌生產中的關鍵環(huán)節(jié)之一,如果接種技術不過關,即會造成雜菌污染,成活率低而前功盡棄,更談不上栽培了。無論是菌種分離、傳代還是擴繁,都要在無菌條件下嚴格按照無菌操作規(guī)程進行。具體要點如下:
1 人員素質
1.1 接種人員要具備認真、細致、自覺、對事業(yè)負責的精神。
1.2 接種人員要牢固樹立無菌觀念,不能存在僥幸心理,切不可麻痹大意。
1.3 接種人員具備鑒別菌種優(yōu)勢的能力,不合格的菌種不能用于生產。
2 環(huán)境消毒
2.1 新制作的或是閑置時間超過15天的接種箱,首次使用前,箱體內、外需用0.1%消霉樂或2%來蘇兒徹底刷洗消毒。并必須用甲醛高錳酸鉀熏蒸消毒。
2.2 閑置超過30天的接種室和緩沖間重新使用前,墻壁需用2%來蘇兒噴濕消毒。對新改建或閑置3個月以上沒用的接種室,使用前,室內墻壁要用石灰漿粉刷,水泥地面用清水沖刷。并必須用甲醛高錳酸鉀熏蒸消毒。最好用20%氫氧化鈉噴灑。
3 空間消毒
將待接種的培養(yǎng)基放入接種箱或接種室后,需對箱或室內進行空間消毒。
3.1 如果是母種傳代或接種量少的原種,可利用接種箱同時放入所用的接種工具,然后用化學藥物熏蒸和紫外線照射進行空間消毒60分鐘。
3.2 如果是量大的原種或三級種生產,培養(yǎng)基放入接種室,同時放入所用的接種工具,再用化學藥物熏蒸,同時配合紫外線照射進行空間消毒60分鐘左右。
3.3 緩沖間內放置作業(yè)服、消毒水、面盆等,接種前要在緩沖間內做好一切準備工作。進入前開啟紫外線燈照射60分鐘,離開緩沖間進入接種室時仍需開啟紫外線燈照射,直至接種結束。
3.4化學藥物熏蒸方法:甲醛每立方米17毫升加14克高錳酸鉀熏蒸1.5小時后接種,之后連續(xù)4次可用氣霧消毒盒熏蒸,二著交替使用。每次熏蒸前用消霉樂噴灑一次。
4 攜帶物消毒
4.1 將母種試管或原種瓶(袋)的棉塞齊管或瓶口剪去,母種試管用75%酒精棉擦洗外壁,原種瓶(袋)用2%來蘇水或0.1%克霉靈水清洗外壁,然后隨接種人員帶入接種箱(室)。
4.2 接種人員經過緩沖間更衣、洗手進入接種室后不得隨便出入,盡量少走動和避免空氣對流。
5 殺菌
利用酒精火焰進行必要的殺菌。
5.1 首先將接種工具(鉤、鏟、刀等)在酒精燈火焰上燒灼后,置于清潔的空試管內冷卻備用。
5.2 將試管母種或原種瓶放在萬能夾上,旋轉式取下棉塞,右手端起酒精燈,讓火焰接觸管口或瓶口,左手將試管或原種瓶慢慢旋轉3~4周,然后將試管或原種瓶固定牢。
6 接種
母種分離、傳代或擴繁時,試管口要控制在離酒精火焰10cm范圍內進行操作。
6.1 用殺菌后的備用接種鉤,除去母種斜面的尖端部分以及中央的母種塊,隨后將接種鉤放回母種試管。
6.2 左手持預接種的試管培養(yǎng)基,管口稍向下傾斜,用右手小拇指和無名指、食指和中指持接種鉤,從母種試管內鉤取直徑約2mm大小的種塊,放入預接種培養(yǎng)基斜面中央,抽出接種鉤,放回母種試管,輕燎右手所持棉塞,旋轉式塞入接過菌的試管,由右手放到適當位置,連續(xù)完成所有預接種試管。
注意:①每次接種時間最長不得連續(xù)超過2小時。②操作時,接種工具尖端和種塊不能接觸到管口和外部其它物體。工具尖端碰到外面物體要重換工具,種塊碰到外面物體則作廢。③一般用種量:每支試管母種可擴繁一級種30-40支左右;擴接原種6~8瓶。
7 安全
7.1 點燃的酒精燈不能靠近棉塞、塑料等易燃物。
7.2 點燃的酒精燈要放牢,在操作過程中嚴防將酒精燈碰翻,以免引起火災。
7.3 接種箱或接種室利用化學藥物進行空間消毒時,要計算空間容積,按照用藥說明使用,不許任意加大用藥量,避免造成藥害。
7.4 紫外線可損傷人體,特別是可引起電光性眼炎。因此,不要在開啟紫外線燈的情況下工作,更不能直視正在開啟的紫外線燈。
7.5各種消毒藥劑要嚴格選擇生產廠家,以免使用偽劣藥造成生產損失。