1.應用菌種:BI—B7原種。
2.生產(chǎn)種質(zhì)量標準及檢驗方法:
(1)外觀標準:菌袋無破裂,袋內(nèi)全部長滿菌絲,菌絲灰白~黃褐色,無雜菌表現(xiàn),無明顯積水,菌種袋壁緊貼,菌種柱上部無明顯干縮,培養(yǎng)后期出現(xiàn)多量黃褐色~黑褐色疣狀物(原基)。
(2)鏡檢:菌絲著色深、粗壯、分枝多、分枝角度大、無鎖狀聯(lián)合,明顯見到側(cè)絲,并可見多量橢圓形的膠陀螺分生孢子,無雜菌污染。
(3)菌種重量標準:每袋350~420g(15×30㎝高壓聚丙烯袋)。
(4)內(nèi)觀檢查同原種。
(5)菌種生物學標準同原種。
3.生產(chǎn)種生產(chǎn)技術規(guī)程:
(1)生產(chǎn)種必須由原種轉(zhuǎn)接。
(2)生產(chǎn)種所用容器為15×30×0.06㎝高壓聚丙烯袋。
(3)培養(yǎng)料配制:
①配方:柞樹木屑40%、農(nóng)作物秸桿(黃豆粉或玉米芯)27%、玉米面15%、麥麩15%、石膏1%、白灰0.5%、過磷酸鈣 1%、硫酸鎂 0.2%、磷酸二氫鉀 0.3%、含水量60~65%、pH值7.0~7.5。
②配制方法:根據(jù)配方要求,先把木屑、玉米芯、石膏等拌勻,然后加水,充分攪拌,力求拌勻,嚴格掌握好含水量60~65%,堆悶2h,讓水分充分吸收后即可裝袋。裝袋要上下松緊一致,一般裝至袋高10~12㎝左右(干料300~350g),將袋面壓平,用直徑3㎝木棍垂直打一中心洞,以便菌絲生長到培養(yǎng)料下層也可得到氧氣,認真清理袋口黏著物,然后封口,封口用頸圈(直徑2㎝)加棉塞,棉塞上扎牛皮紙或報紙。
(4)滅菌:常壓蒸汽滅菌100℃維持10~12h,高壓蒸汽滅菌1.5kg/㎝2下2~2.5h,無論采用何種方法滅菌,必須滅菌徹底。
(5)接種:要確保無菌操作。
①接種前要凈化和消毒接種室,消毒措施為每立方米空間用3~5g氣霧消毒王熏蒸,并用3%來蘇兒噴霧,用紫外線燈照射1h。
②接種用工具,包括接種針、鏟要經(jīng)常消毒
③嚴格挑選原種和處理好原種,接種前要挑選符合優(yōu)質(zhì)菌種標準的適齡的膠陀螺原種,進接種室前要用0.1%漂白粉或0.1%高錳酸鉀消毒液清洗,然后移入接種室內(nèi)。每瓶原種擴接20~30袋生產(chǎn)種。
④要充分利用酒精燈,接種時要做到火焰封口,操作時,不能離開燈火,細心快速,不能粗心大意,整個過程要做到無菌操作。
(6)培養(yǎng):接種后培養(yǎng)對菌種非常重要,要保證平衡發(fā)菌,防止菌種污染、老化和早衰。
①及時揀出雜菌污染。
②創(chuàng)造一個良好的發(fā)菌環(huán)境,溫度22℃±2℃、濕度50~60%,經(jīng)常通風,保持黑暗。
(7)在22℃±2℃條件下,菌絲30~40d可滿袋,5~7d后即可使用。
(8)生產(chǎn)種暫時貯藏條件:菌種長滿袋后移到低溫、黑暗、通風、干燥處。