1、應(yīng)用菌種：BI-B7菌株。
2、菌種質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及檢驗(yàn)方法：
（1）外觀標(biāo)準(zhǔn)：
①菌絲萌動(dòng)初期為白色，隨著生長(zhǎng)發(fā)育逐漸變黃，后變黃褐色，進(jìn)而顏色加深，最后呈明顯的“三色”，外緣呈灰白色，向里呈淺黃色，中間呈黃褐色，斜面菌絲連接緊密，無(wú)斷條狀；菌落邊緣整齊均勻。
②菌絲呈短絨毛狀、氈狀，菌苔厚、氣生菌絲不發(fā)達(dá)。
③菌種保藏時(shí)間超過(guò)三個(gè)月后，菌落顏色加深呈深褐色，邊緣變黑，有黑色代謝產(chǎn)物，部分呈瘤狀物出現(xiàn)。
（2）鏡檢：挑取少許菌絲體，放在載玻片上，用美藍(lán)染色，在1600倍鏡頭下觀察，菌絲透明、粗壯、分枝較多，無(wú)鎖狀聯(lián)合，美藍(lán)單染色著色深，有大量生長(zhǎng)點(diǎn)，無(wú)空泡，無(wú)雜菌污染。
（3）生理生化特征：
①生長(zhǎng)最佳pH值為6.0～6.5；
②生長(zhǎng)最適合溫度為22℃±1～2℃；
③對(duì)氧的要求為好氧性。
（4）測(cè)定菌絲生長(zhǎng)速度：將經(jīng)分離獲得的菌絲體塊，置具PDA培養(yǎng)皿中央22℃±2℃培養(yǎng)，待菌絲向四周邊緣輻射蔓延時(shí)，用測(cè)微尺每隔24h測(cè)定菌落直徑，直至覆蓋全皿為止，從而求出菌絲平均生長(zhǎng)速度。如果菌絲生長(zhǎng)迅速、整齊濃密、健壯有力，則表明為優(yōu)良菌種；若菌絲生長(zhǎng)緩慢或長(zhǎng)速特快、稀疏無(wú)力、參差不齊、易于衰老，則表明為劣質(zhì)菌種。
（5）吃料能力測(cè)定：將菌種接入最佳配方的原種培養(yǎng)料中，置于適宜的溫濕度下培養(yǎng)，一周后，如果菌種塊能很快萌發(fā)，并迅速向四周和培養(yǎng)料中生長(zhǎng)伸展，則說(shuō)明該品種的吃料能力強(qiáng)；反之，菌種塊萌發(fā)后生長(zhǎng)緩慢，遲遲不向四周和料層深處伸展，則表明該菌種對(duì)培養(yǎng)料的適應(yīng)能力差
（6）Bi-B7均一性檢測(cè)：將母鐘接種于普通PDA培養(yǎng)基上，在最適宜培養(yǎng)條件下培養(yǎng)，其長(zhǎng)相和長(zhǎng)速差異不大，幾乎無(wú)肉眼可見(jiàn)的區(qū)別，均一性較好。
（7）BI-B7穩(wěn)定性檢測(cè)：將母種接種于同一培養(yǎng)基上，在同等條件下培養(yǎng)，連續(xù)轉(zhuǎn)管7次無(wú)明顯變化，穩(wěn)定性較好。
3、母種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程
（1）生產(chǎn)母種之前必須做出菇鑒定，不符合母種質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的不準(zhǔn)投入生產(chǎn)。
（2）母種轉(zhuǎn)試管培養(yǎng)基次數(shù)不超過(guò)5～7次，否則必須進(jìn)行提純復(fù)壯。
（3）培養(yǎng)基配制：
①配方：馬鈴薯200g、柞樹(shù)木屑（或柞樹(shù)皮）50g、葡萄糖10g、麥芽糖10g、瓊脂25g、蛋白胨1g、酵母膏1g、磷酸二氫鉀3g、硫酸鎂g克、VB綜合6片、水1000ml、pH值自然；
②配制方法：按配方精確稱量各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，將馬鈴薯去皮、挖眼、洗凈，切成小方塊（約1～1.5㎝左右），與柞樹(shù)木屑按規(guī)定量定量稱取，加水1000ml，進(jìn)行煎煮，煮到熟而不爛，用四層紗布過(guò)濾取汁，再放入瓊脂，邊加熱邊攪拌，待瓊脂完全溶化后，用濕紗布（二層）迅速過(guò)濾，取濾汁補(bǔ)足1000ml，再加其它營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)煮沸，充分溶解后分裝試管，分裝試管時(shí)，要用玻璃漏斗進(jìn)行分裝試管，盡量避免培養(yǎng)基粘附管口，如培養(yǎng)基不慎粘著管口和管壁，要用紗布擦凈，以免培養(yǎng)基粘住棉塞而引起污染，斜面裝量為試管（20×200ml）長(zhǎng)度的1/4。培養(yǎng)基分裝好后，均要塞上棉塞，棉花用普通棉花制作，不宜使用脫脂棉，棉塞的大小、松緊要與試管口徑相稱，塞入試管的棉塞要緊貼管壁，不留縫隙，松緊度以提起棉塞而試管不脫落，撥出棉塞有輕微的聲音為適宜。標(biāo)準(zhǔn)棉塞應(yīng)是塞頭略大，不易變形，入管的部分占塞總長(zhǎng)的2/3，外露1/3為宜，然后按5支試管的數(shù)量捆住一捆，棉塞外包扎牛皮紙或雙層報(bào)紙，以防棉塞受潮。
4、滅菌：將裝培養(yǎng)基的試管置于高壓滅菌鍋中進(jìn)行滅菌，裝鍋時(shí)，試管均要立放，切勿傾斜或平置，蒸氣壓力為1.5kg/㎝2，溫度達(dá)121℃，保持30min，滅菌后，讓其壓力和溫度自然下降以后，取出培養(yǎng)基按要求擺斜面，斜面長(zhǎng)度以不超過(guò)空白管的2/3為宜，培養(yǎng)基冷卻凝固，即成斜面培養(yǎng)基，放在25～28℃條件下，空白培養(yǎng)1～2d，檢查無(wú)污染后備用。
5、接種：母種的接種操作一定要嚴(yán)格按照無(wú)菌操作規(guī)程進(jìn)行，母種接種必須在接種箱或超凈工作臺(tái)進(jìn)行，接種箱或超凈工作臺(tái)使用前用2%來(lái)蘇兒或0.1%新潔爾滅擦拭，并用甲醛或過(guò)氧乙酸或氣霧消毒盒消毒。甲醛用量為每立方米17ml加入14g高錳酸鉀混合熏蒸；若用過(guò)氧乙酸，則每立方米空間用15ml，再加入75%的酒精8ml混合后加熱熏蒸。接種前一小時(shí)打開(kāi)紫外線燈照射，接種人員進(jìn)入接種室則必須更換衣帽，接種前雙手用75%酒精棉球擦拭，然后點(diǎn)燃酒精燈。接種工具要在酒精燈火焰上方嚴(yán)格灼燒。接種時(shí)，將一支斜面母種與另一支待接斜面培養(yǎng)基試管放在左手掌心，再用手指夾緊試管，右手拿接種針，將管口棉塞撥出，試管在火焰上灼燒2～3s，管口盡量靠近火焰的無(wú)菌區(qū)，將接種針迅速插入原始母種試管內(nèi)，迅速挑取豆粒大小的一塊菌絲體連同少量培養(yǎng)基，移入待接試管斜面培養(yǎng)基的中央。移菌時(shí)，不能讓挑取的菌種接觸管壁。取出接種針，將兩個(gè)試管口在火焰上灼燒2～3s，棉塞塞入試管內(nèi)部分也在火焰上微燎，并迅速塞入各自試管口。一支母種可擴(kuò)大轉(zhuǎn)接20支左右試管。轉(zhuǎn)完一支母種，所有接種工具都要用酒精燈火焰再次灼燒，雙手也重新用75%酒精棉球消毒。
6、培養(yǎng)：母種培養(yǎng)一般在恒溫箱內(nèi)進(jìn)行，培養(yǎng)溫度為22±2℃，濕度為50～60%，光線黑暗，經(jīng)7～10d，菌絲可布滿整個(gè)斜面，接種后的母種，必須每三天檢查一次，有雜菌污染或菌絲生長(zhǎng)表現(xiàn)異常的的進(jìn)行淘汰和作好詳細(xì)記錄，達(dá)到母種質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的即可生產(chǎn)使用，若不立即使用，則應(yīng)放在冰箱中在4℃情況下保存?zhèn)溆?，每?/span>3～4個(gè)月轉(zhuǎn)管一次或采用其它有效方法貯存。
7、母種必須設(shè)專人管理，詳細(xì)作好檔案記錄，付出母種必須有嚴(yán)格的登記與簽字手續(xù)。