國內(nèi)關(guān)于羊肚菌人工馴化栽培的最早記錄是1983年(顧云龍 1983)。
在1883年《中國食用菌》雜志的第二期上,顧云龍發(fā)表了其對黑脈羊肚菌的引種馴化研究。
顧龍云(1983)對甘南、臨潭、洮河林區(qū)的野生羊肚菌調(diào)研發(fā)現(xiàn),黑脈羊肚菌(M.angusticeps)子實體在云、冷杉林山谷伐木滑道下生長得最多,其中有的菌絲休在枯枝落葉層下腐殖質(zhì)中的腐木上生長發(fā)育,當溫、濕度適宜時便形成子實體。
作者隨后對其進行了孢子分離和栽培實驗,其中孢子分離方法為懸掛孢子彈射法(圖1~2 所示)。具體做法是:將羊肚菌子實休切棄帶泥的菌柄基部,用無菌水沖洗數(shù)次后置無菌箱內(nèi)的無菌燒杯中。接下來的操作均以無菌操作規(guī)范進行:首先用75%的酒精棉球?qū)ρ蚨蔷訉嶓w進行表面消毒,用鐵絲彎鉤掛住菌柄基部,將子實體倒掛在三角瓶中,使羊肚菌菌蓋的最低端距瓶底培養(yǎng)基表面2 ~ 3 cm,塞上棉塞,置于16 ~ 18℃,并用 40 W日光燈照射,24 h左右,即可見到像一陣煙霧似的子囊孢子散落在培養(yǎng)基上(注:即便看不到彈射的孢子也沒關(guān)系)。隨后,在無菌條件下丟棄子實體,將三角瓶置于20℃恒溫培養(yǎng),待孢子萌發(fā)形成菌落后進行純化、轉(zhuǎn)管操作,并鏡檢獲得的羊肚菌純菌種。
圖1懸掛法進行孢子彈射分離(顧龍云1983)
顧龍云(1983)所進行的孢子萌發(fā)和轉(zhuǎn)管所用的培養(yǎng)基分兩種,其中1號培養(yǎng)基為:腐殖質(zhì)土浸出液300 mL(菇木周圍的土200 g加水500 mL煮沸過濾)、菇木浸出掖液100 mL(菇木50 g、加水300 mL煮沸過濾)、子實體浸出液100 mL(子實體25 g、加水300 mL煮沸過濾)、葡萄糖5 g、磷酸二氫鉀0.5 g、硫酸鎂0.5 g、尿素0.5 g、石膏粉1 g、瓊脂10 g,加水至500 mL;2號培養(yǎng)基以1號培養(yǎng)基中不添加子實體浸出液,其他成分相同;培養(yǎng)基pH 7.2 ~ 7.5之間,滅菌后備用。作者指出,20℃培育,1號培養(yǎng)基菌絲生長較快,菌絲整體整齊、濃密、粗壯,7 ~ 10 d可長滿斜面,2號培養(yǎng)基生長較慢,菌絲參差不齊、稀疏、細弱,10 ~ 14 d長滿斜面。
顧云龍所進行的栽培實驗以櫟木屑75%、麩皮15%、腐殖質(zhì)土5%、過磷酸鈣0.4%、葡萄糖1%、硫酸銨0.5%、磷酸二氫鉀0.05%、硫酸鎂0.05%、尿素1%、石膏粉1%為主,并以添加或不添加1%的羊肚菌子實體碎粉作為可選項進行裝瓶、滅菌,接種、養(yǎng)菌完成后,進行催菇處理(保持空氣濕度80% ~ 85%,散射光照射)。最終發(fā)現(xiàn),在添加有1%子實體碎粉的培養(yǎng)基上,16 ~ 20℃條件下,35 d可長滿全瓶,55 d出現(xiàn)珊瑚型綠豆大的子實體原基,繼續(xù)培養(yǎng)至65 d,原基不再進一步分化,在未添加羊肚菌子實體碎粉的固體培養(yǎng)基上,菌絲生長慢,45 d僅生長到全瓶的1 / 2 , 繼續(xù)培養(yǎng)至65 d,未形成原基。
雖然作者(顧龍云1983)指出,55 d的培育獲得珊瑚型綠豆大的羊肚菌子實體原基,但最終未能獲得成熟的羊肚菌子實體。從全文來看,雖然作者也對獲得菌絲物進行鏡檢,指出菌絲有分隔,無鎖狀聯(lián)合,但作者并未記錄菌絲的顏色變化、菌核等羊肚菌的其他典型特征,加之20℃的試管種和瓶栽培養(yǎng)時間均明顯長于正常的羊肚菌生長速度(編者注:PDA或CYM培養(yǎng)基,20 ~ 23℃培育,180×18 mm試管,平均4 ~ 6 d即可長滿,6 ~ 9 d可形成菌核;750 mL原種瓶,20 ~ 23℃培育,20 ~ 25 d即可完全長滿);且從培養(yǎng)基組成來看,作者使用的培養(yǎng)基營養(yǎng)均比較豐富,這不是菌絲生長緩慢的原因所在,因此,這里我們無法對作者獲得的羊肚菌菌種純度進行判別。作者進行的瓶栽實驗思路和常規(guī)的食用菌如金針菇、杏鮑菇等瓶栽相似,屬于早期的仿生栽培理念。雖然作者指出獲得珊瑚狀原基,但缺乏對其獲得的原基的詳細描述,也無法判定,其是否為真正的羊肚菌原基。(未完待續(xù))
劉偉授權(quán)易菇網(wǎng)獨家刊載,未經(jīng)許可,禁止轉(zhuǎn)載。
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