戴潔; 貢岳松; 胡卓逸
中國(guó)藥科大學(xué)生化研究室!南京210009; 中國(guó)藥科大學(xué)生化研究室!南京210009; 中國(guó)藥科大學(xué)生化研究室!南京210009

【中文摘要】 <正>鈣調(diào)素(Calmodulin,CaM)是廣泛存在于一切真核生物中的一種多功能調(diào)節(jié)蛋白,作為細(xì)胞內(nèi)的主要鈣離子受體,人們確信它在動(dòng)物、植物細(xì)胞功能活動(dòng)中起著重要作用,目前有關(guān)真菌CaM的研究較少,對(duì)真菌CaM性質(zhì)的系統(tǒng)研究,國(guó)內(nèi)尚無(wú)報(bào)道。本文從平菇(Pleurotus ostreatus)中分離純化得到真菌CaM,并做了有關(guān)物理化學(xué)特性及其生物活性的研究。 一、材料和方法 (一)供試材料 平菇購(gòu)自南京蔬菜研究所;苯基瓊脂糖Phenyl-sepharose CL 4B為Pharmacia產(chǎn)品;DEAE-Cellulose 32為Whatman產(chǎn)品;Ampholyte為中國(guó)科學(xué)院上海生化所產(chǎn)品,其余試劑均為分析純。 (二)試驗(yàn)方法 包括以下五個(gè)方面。 1.平菇CaM的分離純化:平菇加入3倍體積緩沖液A(Buffer A:20mmol/l Tris-HCl,1mmol/l)巰基乙醇,0.5mmol/l PMSF,2retool/l EDAT,pH17.5)勻漿10″×6次,8000g離心30分鐘,重復(fù)抽提,合并上清,加入30％TCA至終濃度為3％,離心,棄上清,沉淀用緩沖液攪...更多勻透析過(guò)夜,再加適量緩沖液A,用1mol/l Tris-base調(diào)pH17.5,攪拌30分鐘,10000g離  還原

【文獻(xiàn)出處】 食用菌,Edible Fungi,編輯部郵箱,1994年05期 【DOI】CNKI:SUN:SIYJ.0.1994-05-008