【作者】戚元成 李建立 邱立友 申進(jìn)文 王瑞霞
【機(jī)構(gòu)】河南農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所農(nóng)業(yè)部南方食用菌資源利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室國(guó)家食用菌工程技術(shù)研究中心上海市農(nóng)業(yè)遺傳育種重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室
摘要：根據(jù)肺形側(cè)耳(Pleurotus pulmonarius)產(chǎn)孢相關(guān)基因stpp1,采用反轉(zhuǎn)錄PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)技術(shù)克隆出糙皮側(cè)耳(P.ostreatus)產(chǎn)孢相關(guān)基因同源物stpo1全長(zhǎng),并對(duì)其保守域進(jìn)行生物信息學(xué)分析,使用pEASY-E2原核表達(dá)系統(tǒng)進(jìn)行該基因的原核表達(dá),通過(guò)熒光定量PCR分析stpo1表達(dá)模式。結(jié)果表明:糙皮側(cè)耳stpo1全長(zhǎng)cDNA序列為2556bp,預(yù)測(cè)編碼851個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì),具有錯(cuò)配修復(fù)DNA結(jié)合域(MUTSd)、ATP結(jié)合位點(diǎn)(ABC-ATPase)以及錯(cuò)配修復(fù)域(MutS),屬于錯(cuò)配修復(fù)家族。十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)顯示stpo1在原核細(xì)胞中具有表達(dá)活性,定量PCR顯示stpo1在糙皮側(cè)耳不同發(fā)育階段顯現(xiàn)不同的表達(dá)水平并且在成熟子實(shí)體菌褶中的表達(dá)量明顯高于其它部位,表明該基因可能與糙皮側(cè)耳的孢子形成有相關(guān)性。
基金：國(guó)家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系專項(xiàng)資金(CARS-24)； 河南省高等學(xué)校重點(diǎn)科研項(xiàng)目(13B180051)； 河南省高等學(xué)校重點(diǎn)科研項(xiàng)目(14A180023)資助；
關(guān)鍵詞：糙皮側(cè)耳; 產(chǎn)孢相關(guān)基因stpo1; RT-PCR; 原核表達(dá); 表達(dá)模式;