【作者】章先 方云 付子賢 周一釗 方維煥 宋厚輝

【機(jī)構(gòu)】浙江農(nóng)林大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院中澳動(dòng)物健康大數(shù)據(jù)分析聯(lián)合實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物健康檢測(cè)互聯(lián)網(wǎng)技術(shù)浙江省工程實(shí)驗(yàn)室浙江大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院浙江省檢驗(yàn)檢疫科學(xué)技術(shù)研究院

摘要：黃曲霉毒素B1（aflatoxin B1,AFB1）在自然界普遍存在,可污染多種糧食作物和飼料,給動(dòng)物和人類健康造成嚴(yán)重威脅。為建立AFB1高靈敏度的快速檢測(cè)方法,本研究通過(guò)采用納米金顆粒（Au nanoparticles,AuNPs）和辣根過(guò)氧化物酶（horseradish peroxidase,HRP）雙標(biāo)記AFB1單克隆抗體,建立新型酶聯(lián)免疫檢測(cè)方法（HRP-AuNPs IC-ELISA）,檢測(cè)下限（IC10）為0.017ng/mL,檢測(cè)區(qū)間(IC20–IC80)為0.026–0.376ng/mL,半數(shù)抑制率(IC50)為0.099ng/mL,與黃曲霉毒素B2、G1、G2和M1的交叉反應(yīng)率分別為2.7%、9.3%、2.1%和5.3%,與赭曲霉毒素A、伏馬毒素B1、桔青霉素、展青霉毒素和玉米赤霉烯酮幾乎不存在交叉反應(yīng)。在玉米和面粉樣本中的加標(biāo)回收率可達(dá)88.93–103.55%,與LC-MS/MS同時(shí)對(duì)天然樣本中AFB1含量進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果表明,兩種方法相關(guān)性良好。本研究建立的HRP-AuNPs IC-ELISA耗時(shí)短且靈敏度高,可用于實(shí)際樣本中AFB1的快速定量檢測(cè)與分析,也為其他霉菌毒素的精準(zhǔn)檢測(cè)技術(shù)開(kāi)發(fā)提供參考。 

 

基金：浙江省自然科學(xué)基金(LQ17C170002)； 浙江農(nóng)林大學(xué)人才項(xiàng)目(2016FR025)； 浙江省重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃(2018C02041)； 國(guó)家高新技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃(863計(jì)劃)(2012AA101602)~~；

 

關(guān)鍵詞：黃曲霉毒素B1; 納米金顆粒; 辣根過(guò)氧化物酶; 單克隆抗體;