【作者】張姝 賀瑞紅 趙宇翔 張永杰
【機(jī)構(gòu)】山西大學(xué)應(yīng)用化學(xué)研究所山西大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院
摘要:本研究的目的是建立一種快速確定蛹蟲草菌株線粒體基因型的技術(shù)體系,并探討蛹蟲草連續(xù)傳代培養(yǎng)后線粒體的遺傳穩(wěn)定性。從已知線粒體基因組的蛹蟲草菌株中擴(kuò)增線粒體內(nèi)含子位點(diǎn),將擴(kuò)增產(chǎn)物混合并制作出兩套DNA分子量標(biāo)準(zhǔn),即在8個(gè)內(nèi)含子位點(diǎn)分別具有內(nèi)含子的8條擴(kuò)增條帶組成的M-I和在6個(gè)內(nèi)含子位點(diǎn)分別缺失內(nèi)含子的6條擴(kuò)增條帶組成的M-II。從待檢測(cè)的蛹蟲草菌株(包括3個(gè)已知和2個(gè)未知線粒體基因組的菌株)中擴(kuò)增同樣的(假定)內(nèi)含子位點(diǎn),然后通過瓊脂糖凝膠電泳分別與制備好的兩個(gè)DNA分子量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較,能夠準(zhǔn)確判斷蛹蟲草菌株的線粒體內(nèi)含子分布模式,從而驗(yàn)證了所構(gòu)建的線粒體基因型快速檢測(cè)體系的有效性。選擇10個(gè)蛹蟲草組織分離菌株和8個(gè)單分生孢子菌株連續(xù)轉(zhuǎn)接培養(yǎng)15代,沒有發(fā)現(xiàn)線粒體內(nèi)含子分布模式發(fā)生改變。本研究成功構(gòu)建了快速檢測(cè)蛹蟲草線粒體基因型的技術(shù)體系,并發(fā)現(xiàn)蛹蟲草線粒體具有很高的遺傳穩(wěn)定性,為開展蛹蟲草線粒體遺傳規(guī)律的研究奠定了基礎(chǔ)。
基金:山西省自然科學(xué)基金(201601D011065); 山西省留學(xué)回國人員科技活動(dòng)擇優(yōu)資助項(xiàng)目; 山西省回國留學(xué)人員科研資助項(xiàng)目(2017-015)~~;
關(guān)鍵詞:蛹蟲草; 線粒體基因型; 快速檢測(cè); 內(nèi)含子; 遺傳穩(wěn)定性;