【作者】蘇文英盛立柱代月婷宋冰付永平李玉

【機(jī)構(gòu)】吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院食藥用菌教育部工程中心龍泉市食藥用菌產(chǎn)業(yè)辦公室

摘要：凝集素在食用菌的生長(zhǎng)發(fā)育、抗病蟲等逆境及抗腫瘤等方面發(fā)揮著重要的作用,但是關(guān)于糙皮側(cè)耳凝集素基因的抗逆功能研究還比較薄弱。因此,本文利用PCR技術(shù)克隆得到糙皮側(cè)耳子實(shí)體凝集素polectin2基因及其啟動(dòng)子序列,測(cè)序和生物信息學(xué)結(jié)果顯示該基因不含內(nèi)含子,完整開放閱讀框?yàn)?08bp,編碼136個(gè)氨基酸,預(yù)測(cè)蛋白分子量15.3k Da;啟動(dòng)子polectinpro序列長(zhǎng)度為927bp,生物數(shù)據(jù)庫PLACE分析結(jié)果表明polectinpro含有低溫、干旱脅迫誘導(dǎo)和病程相關(guān)等抗逆元件。然后,構(gòu)建含有GFP融合蛋白的重組植物表達(dá)載體pCAMBIA1302-polectinpro-gfp,并進(jìn)行煙草遺傳轉(zhuǎn)化,結(jié)果證明該啟動(dòng)子能夠在低溫誘導(dǎo)下驅(qū)動(dòng)gfp基因表達(dá)。同時(shí)成功構(gòu)建了含有polectin2的重組植物表達(dá)載體pCAMBIA1301-polectin2并進(jìn)行了煙草遺傳轉(zhuǎn)化;對(duì)陽性轉(zhuǎn)化植株T1代和野生型種子進(jìn)行低溫脅迫實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明轉(zhuǎn)基因種子萌發(fā)率明顯高于野生型。綜上所述,推測(cè)polectin2基因具有耐低溫功能,且其啟動(dòng)子具有低溫誘導(dǎo)活性。上述結(jié)果為進(jìn)一步利用子實(shí)體凝集素polectin2基因提高食用菌的耐低溫等抗逆功能提供了理論依據(jù)和技術(shù)支持。 還原

 

基金：公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(xiàng)(201503137)； 973項(xiàng)目(2014CB138305)； 吉林省秸稈綜合利用技術(shù)創(chuàng)新平臺(tái)(吉高平合字[2014]B-1)； 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)校內(nèi)啟動(dòng)基金(2015007)； 吉林省科技發(fā)展項(xiàng)目(20140101148JC)~~；

 

關(guān)鍵詞：糙皮側(cè)耳; 凝集素基因; 低溫; 功能驗(yàn)證; 轉(zhuǎn)化植株;