【作者】王登杰 王海鴻 張?zhí)?雷仲仁
【機(jī)構(gòu)】中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所植物病蟲(chóng)害生物學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室
摘要：同一種蟲(chóng)生真菌的不同菌株對(duì)于特定昆蟲(chóng)宿主的毒力可存在顯著差異,真菌在昆蟲(chóng)體內(nèi)的生長(zhǎng)能力不同可能是引起這種差異的原因之一。為了探討真菌在宿主體內(nèi)的生長(zhǎng)動(dòng)力學(xué)與其毒力的關(guān)系,本研究用生測(cè)法測(cè)定了3株球孢白僵菌(GZGY‐1‐3、SCWJ‐2、WLMQ‐20)在高劑量(1×108孢子/m L)和低劑量(1×106孢子/m L)下對(duì)煙粉虱4齡若蟲(chóng)的毒力,用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)對(duì)真菌在宿主體內(nèi)的拷貝數(shù)進(jìn)行了定量,用熒光顯微方法觀察了白僵菌侵染煙粉虱的過(guò)程。生物測(cè)定實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:不論在高劑量還是低劑量下,菌株GZGY‐1‐3殺死煙粉虱所需的時(shí)間最短(在高劑量和低劑量下LT50分別為2.29d和6.10d),其次是菌株SCWJ‐2(LT50分別為3.03d和7.38d),菌株WLMQ‐20所需時(shí)間最長(zhǎng)(LT50分別為4.13d和9.39d)。對(duì)于同一菌株,其高劑量下的毒力顯著高于低劑量下的毒力。實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)顯示,接觸高劑量孢子后煙粉虱獲得的孢子數(shù)遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于接觸低劑量時(shí)的孢子數(shù)。接種后,每一菌株和每一劑量下的真菌生長(zhǎng)都表現(xiàn)出一個(gè)相似的模式。在接種24h后,真菌細(xì)胞數(shù)量顯著下降,在接種后24–48h之間是一個(gè)簡(jiǎn)短的恢復(fù)階段,接種48–72h后是真菌的細(xì)胞數(shù)略有凈增長(zhǎng)的穩(wěn)定時(shí)期,在宿主死亡前后的階段,真菌數(shù)量急劇增加,與接種后最初24h相比高了近1 000倍。然而,盡管它們的生長(zhǎng)模式相似,但是卻存在著量上的差異,由致病性強(qiáng)、劑量高的菌株侵染的昆蟲(chóng)體內(nèi)的最終真菌菌體數(shù)高。熒光顯微技術(shù)觀察到的白僵菌對(duì)煙粉虱的侵染過(guò)程證實(shí)了定量PCR的結(jié)果。這些結(jié)果說(shuō)明菌株間毒力的差異在一定程度上是由真菌生長(zhǎng)動(dòng)力學(xué)的量化差異所決定的。
基金：公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專(zhuān)項(xiàng)(201303019-02)； 國(guó)家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專(zhuān)項(xiàng)資金(CARS-25-B-07)~~；
關(guān)鍵詞：球孢白僵菌; 煙粉虱; 生長(zhǎng)動(dòng)力學(xué); 毒力; 定量PCR;