【作者】張亞軍 金慶日 邵春艷 桂海孌 方維煥 楊夢華 宋厚輝
【機構】浙江農林大學動物科技學院浙江大學動物科學學院
摘要：桔青毒素(citrinin,CTN)是以玉米、谷物、奶酪等為主要成分的食品和動物飼料中常見的、由桔青霉菌產生的酮類真菌毒素,可引起人和動物的慢性中毒或癌癥,一直缺少靈敏的快速檢測方法。本文通過指數富集適體系統進化技術(簡稱SELEX)對可能與CTN結合的特異性適體進行了篩選,經過15輪循環(huán),得到17條適體。通過二級結構分析、親和力檢測發(fā)現適體13(Apt-13)對CTN有較好的親和度,解離常數Kd為0.06μmol/L。進一步利用非熒光標記染料Pico Green,利用其與雙鏈DNA結合的原理,建立了桔青毒素非標記熒光檢測方法,30min完成檢測,最低檢測限達到國家標準(50ppb)且與其他毒素無交叉反應。本研究建立的基于適體的桔青毒素檢測技術成本低,可以替代傳統的基于抗體的檢測方法,為霉菌毒素的精準檢測技術的開發(fā)提供了實驗證據。
基金：國家高技術研究發(fā)展計劃(863計劃)(2012AA101602)； 浙江省科學技術廳重大科技專項重大農業(yè)項目(2014C02003)； 浙江農林大學人才項目(2011FR025； 2012FR047； 2013FR012； 2013FR054)~~；
關鍵詞：桔青毒素; 指數富集適體系統進化技術; 適體; 親和度;