【作者】李慧燕 林良才 肖冬光 田朝光
【機(jī)構(gòu)】天津科技大學(xué)生物工程學(xué)院 中國(guó)科學(xué)院天津工業(yè)生物技術(shù)研究所系統(tǒng)微生物工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室
摘要：絲狀真菌的木質(zhì)纖維素水解酶基因的表達(dá)很大程度上受到轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控,對(duì)纖維素酶系調(diào)控轉(zhuǎn)錄因子的研究對(duì)提高纖維素酶的產(chǎn)量具有重要意義。為了挖掘纖維素酶表達(dá)新調(diào)控基因,本研究對(duì)粗糙脈孢菌鋅指轉(zhuǎn)錄因子C2H2家族的57株基因敲除突變株在以2%結(jié)晶纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)條件下進(jìn)行產(chǎn)纖維素酶水平分析篩選。通過(guò)測(cè)定發(fā)酵液的蛋白、內(nèi)切β-1,4-葡聚糖酶酶活、外切纖維素酶酶活、β-葡萄糖苷酶酶活、木聚糖酶酶活及生物量,發(fā)現(xiàn)突變株L-38、L-85、L-40、L-64、L-99、L-07、L-86在蛋白水平及內(nèi)切β-1,4-葡聚糖酶酶活水平均比野生型有25%–77%不等的顯著提高,而突變株L-87、L-06在蛋白水平及內(nèi)切β-1,4-葡聚糖酶酶活水平均比野生型有65%–80%不等的顯著降低。這些纖維素酶新調(diào)控基因的獲得為后續(xù)相關(guān)表達(dá)調(diào)控的研究提供了新素材。
基金：國(guó)家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃(973計(jì)劃； 2011CB707403)~~；
關(guān)鍵詞：轉(zhuǎn)錄因子; 纖維素酶; 粗糙脈孢菌; 鋅指蛋白; 表達(dá)調(diào)控;