【作者】王孟蘭 趙妍 陳明 杰汪虹
【機(jī)構(gòu)】國家食用菌工程技術(shù)研究中心,農(nóng)業(yè)部南方食用菌資源利用重點(diǎn)實(shí)驗室,上海市農(nóng)業(yè)遺傳育種重點(diǎn)開放實(shí)驗室,上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所南京農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院
【摘要】木聚糖酶是半纖維素酶系的重要組成部分,能夠分解水稻、小麥等農(nóng)作物秸稈中的半纖維素。研究探討木聚糖酶相關(guān)基因及其功能,為進(jìn)一步探討木聚糖酶與草菇生物轉(zhuǎn)化率之間的關(guān)系提供理論依據(jù)。首先通過生物信息學(xué)手段構(gòu)建了草菇2個木聚糖酶基因xyn1和xynII編碼氨基酸序列的系統(tǒng)進(jìn)化樹,然后從生物轉(zhuǎn)化率不同的草菇菌株分別提取各自的RNA,反轉(zhuǎn)錄為cDNA后,采用實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)分析了xyn1和xynII基因的轉(zhuǎn)錄表達(dá)情況;最后應(yīng)用DNS法對這些菌株中的木聚糖酶活性進(jìn)行了測定。研究結(jié)果表明,xyn1編碼的氨基酸序列與草腐菌相似性較高,而xynII編碼的氨基酸序列與木腐菌遺傳差異較小。在木聚糖酶活性測定和實(shí)時熒光定量PCR結(jié)果中,不同菌株的木聚糖酶活性趨勢與xynII的轉(zhuǎn)錄表達(dá)趨勢相似,均呈現(xiàn)依次遞減。草菇的木聚糖酶活性與其生物轉(zhuǎn)化率之間存在正相關(guān)性,推測草菇不同菌株木聚糖酶活性差異可能表現(xiàn)在轉(zhuǎn)錄水平上的差異。
【基金】上海市科技興農(nóng)重點(diǎn)攻關(guān)項目(2011第1-2號); 上海市市級農(nóng)口系統(tǒng)青年人才成長計劃[滬農(nóng)青字(2014)第1-17號];
【關(guān)鍵詞】草菇; 木聚糖酶; 實(shí)時熒光定量PCR; 系統(tǒng)進(jìn)化樹;