【作者】劉曉燕 羅振鵬 崔偉康 林漳豐 岳開(kāi)華 王嵩瑞 李振方
【機(jī)構(gòu)】福建農(nóng)林大學(xué)作物科學(xué)學(xué)院
摘要：為分析對(duì)地黃有較強(qiáng)致病性的尖孢鐮刀菌的侵染機(jī)制,本研究采用攜帶有潮霉素抗性標(biāo)記的強(qiáng)組成型表達(dá)載體p CT74,經(jīng)PEG-Ca Cl2介導(dǎo)的原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入鐮刀菌,獲得熒光信號(hào)強(qiáng)烈的s GFP標(biāo)記菌株,并采用噴施接種和根部灌根接種。研究發(fā)現(xiàn)鐮刀菌首先在地黃外部聚集繁殖,并通過(guò)傷口或氣孔等通道侵入地黃維管組織,后逐漸導(dǎo)致周圍海綿組織破裂,進(jìn)而致使地下根莖逐漸變黑腐爛;由于地黃葉部氣孔發(fā)達(dá),使得鐮刀菌由葉部侵入速度要快于根部灌根接種;不同孢子濃度接種實(shí)驗(yàn)表明鐮刀菌對(duì)寄主的致害程度與其在葉部與根部的接種濃度并不呈相關(guān)性。進(jìn)一步在接種處理后采集地黃葉部、莖部和根部組織提取真菌DNA后進(jìn)行PCR擴(kuò)增發(fā)現(xiàn):在根部接種60h后即能檢測(cè)到鐮刀菌的侵入,經(jīng)84h后侵入到地黃莖部組織,經(jīng)96h后侵入到地黃葉部組織。該標(biāo)記菌株可為今后探索地黃連作栽培中真菌病害大規(guī)模爆發(fā)的根際生物學(xué)過(guò)程提供研究材料。
基金：國(guó)家自然科學(xué)基金(31201694)； 福建省教育廳科技項(xiàng)目(JA13474)~~；
關(guān)鍵詞：地黃; 尖孢鐮刀菌; 連作障礙; 綠色熒光蛋白;