【作者】盛立柱 宋冰 戴月婷 李丹 付永平 李玉
【機(jī)構(gòu)】吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)食藥用菌教育部工程中心
摘要：以刺芹側(cè)耳菌絲球?yàn)槭荏w,潮霉素(Hyg)為篩選標(biāo)記,應(yīng)用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法對(duì)刺芹側(cè)耳菌絲進(jìn)行了遺傳轉(zhuǎn)化研究。潮霉素敏感性測(cè)試結(jié)果表明,刺芹側(cè)耳Hyg耐受濃度為50mg/L。農(nóng)桿菌介導(dǎo)的刺芹側(cè)耳菌絲最佳遺傳轉(zhuǎn)化體系為:菌液濃度OD600=0.6–0.7,侵染時(shí)間30–35min,共培養(yǎng)時(shí)間2d,侵染液和共培養(yǎng)培養(yǎng)基中乙酰丁香酮(AS)濃度為1mg/m L;經(jīng)潮霉素抗性篩選、PCR鑒定和GUS活性的組織化學(xué)分析,表明外源基因GUS已轉(zhuǎn)入到刺芹側(cè)耳菌絲中,并獲得表達(dá)。本實(shí)驗(yàn)成功地建立了穩(wěn)定的農(nóng)桿菌介導(dǎo)的刺芹側(cè)耳遺傳轉(zhuǎn)化體系。
基金：國(guó)家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃(2014CB138305)； 國(guó)家自然基金項(xiàng)目(31471926)； 省技廳項(xiàng)目(20140101149JC)；
關(guān)鍵詞：刺芹側(cè)耳; 菌絲球; 農(nóng)桿菌; GUS染色; 轉(zhuǎn)化體系;