【作者】逄春梅 張亮 孫春玉 蔣世翠 王康宇 張美萍 王義
【機(jī)構(gòu)】吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院
【摘要】為探討人參大片段DNA轉(zhuǎn)化靈芝的可能性,通過電擊法將雙元細(xì)菌人工染色體(BIBAC)載體上的100kb人參大片段DNA轉(zhuǎn)化到靈芝原生質(zhì)體內(nèi)。研究發(fā)現(xiàn),在電極間距為4mm,電壓強(qiáng)度為240V時,將5μL的人參大片段DNA轉(zhuǎn)化到75μL的靈芝原生質(zhì)體,在選擇培養(yǎng)基上獲得了具有再生能力的轉(zhuǎn)化子。根據(jù)克隆載體兩側(cè)的序列設(shè)計(jì)兩對引物,對轉(zhuǎn)化子進(jìn)行PCR分析。試驗(yàn)結(jié)果表明人參大片段DNA已經(jīng)轉(zhuǎn)化到靈芝的基因組中。
【基金】吉林省科學(xué)技術(shù)廳項(xiàng)目(No.200905107); 吉林省教育廳“十一五”科技技術(shù)研究項(xiàng)目(No.吉教科合字[2009]48號);
【關(guān)鍵詞】靈芝原生質(zhì)體; 電擊法; 雙元細(xì)菌人工染色體; 轉(zhuǎn)化子;