【作者】張國慶 王有志 王守現(xiàn) 王賀祥 陳青君
【機構】北京農(nóng)學院農(nóng)業(yè)部都市農(nóng)業(yè)(北方)重點實驗室 中國農(nóng)業(yè)大學生物學院農(nóng)業(yè)生物技術國家重點實驗室 中國科學院微生物研究所菌種保藏中心 北京市農(nóng)林科學院植物保護環(huán)境保護研究所
摘要：樹狀多節(jié)孢Nodulisporium sylviforme是從東北紅豆杉Taxus cuspidata分離、可產(chǎn)生紫杉醇的內(nèi)生真菌。研究以樹狀多節(jié)孢為材料,利用液體發(fā)酵手段獲得菌絲體,通過CM-cellulose陰離子交換柱層析、Q-Sepharose陽離子交換柱層析和FPLC凝膠過濾層析(Superdex 75),獲得純化的樹狀多節(jié)孢酸性磷酸酶蛋白(Nod-ACP)。結合FPLC和SDS-PAGE分析,判定該磷酸酶為分子量44kDa單亞基蛋白。酶學性質(zhì)研究表明,其最適pH值為3.0,最適溫度為58℃。6.25-50mmol/L的Ca2+、Mn2+、Mg2+和Zn2+對酶活有30%-50%的促進作用,而Cu2+、Al3+和Fe3+對酶活有顯著的抑制作用;當Fe2+濃度低于25mmol/L時表現(xiàn)為促進作用,但濃度達到50mmol/L時磷酸酶完全失活。
基金：北京市科委項目(No.Z101105002510003)； 北京市屬高等學校人才強教項目(No.PHR200907136)；
關鍵詞：樹狀多節(jié)孢; 酸性磷酸酶; 性質(zhì); 酶活性;
【機構】北京農(nóng)學院農(nóng)業(yè)部都市農(nóng)業(yè)(北方)重點實驗室 中國農(nóng)業(yè)大學生物學院農(nóng)業(yè)生物技術國家重點實驗室 中國科學院微生物研究所菌種保藏中心 北京市農(nóng)林科學院植物保護環(huán)境保護研究所
摘要：樹狀多節(jié)孢Nodulisporium sylviforme是從東北紅豆杉Taxus cuspidata分離、可產(chǎn)生紫杉醇的內(nèi)生真菌。研究以樹狀多節(jié)孢為材料,利用液體發(fā)酵手段獲得菌絲體,通過CM-cellulose陰離子交換柱層析、Q-Sepharose陽離子交換柱層析和FPLC凝膠過濾層析(Superdex 75),獲得純化的樹狀多節(jié)孢酸性磷酸酶蛋白(Nod-ACP)。結合FPLC和SDS-PAGE分析,判定該磷酸酶為分子量44kDa單亞基蛋白。酶學性質(zhì)研究表明,其最適pH值為3.0,最適溫度為58℃。6.25-50mmol/L的Ca2+、Mn2+、Mg2+和Zn2+對酶活有30%-50%的促進作用,而Cu2+、Al3+和Fe3+對酶活有顯著的抑制作用;當Fe2+濃度低于25mmol/L時表現(xiàn)為促進作用,但濃度達到50mmol/L時磷酸酶完全失活。
基金：北京市科委項目(No.Z101105002510003)； 北京市屬高等學校人才強教項目(No.PHR200907136)；
關鍵詞：樹狀多節(jié)孢; 酸性磷酸酶; 性質(zhì); 酶活性;