【作者】楊立紅 高興喜 繆靜 圖力古爾
【機構(gòu)】魯東大學生命科學學院山東省食用菌技術重點實驗室 魯東大學菌物科學與技術研究院
摘要：以斑玉蕈為材料分別從菌蓋和菌柄中提取一種酸性磷酸酯酶(ACPase,EC.3.1.3.2),進一步用硫酸銨沉淀分離,Sephadex G-200柱純化,從菌蓋中分離到3個酶組分,從菌柄中分離到4個酶組分,分別對菌蓋和菌柄的酶Ⅰ和酶Ⅰ′進行聚丙烯酰胺凝膠(PAGE)電泳純度鑒定,均呈現(xiàn)單一酶蛋白帶。SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)測定酶Ⅰ和酶Ⅰ′的相對分子量均為65kDa,SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳及Sephadex G-75凝膠過濾測定分析,酶Ⅰ和酶Ⅰ′均為單亞基蛋白。紫外吸收光譜(UV)測定結(jié)果表明,酶Ⅰ和酶Ⅰ′均呈現(xiàn)兩個吸收峰,分別在220nm和280nm處;酶Ⅰ和酶Ⅰ′等電點(pI)分別為5.4和5.0;水解對硝基苯磷酸二鈉(PNPP)最適pH值分別為5.0和4.6;酶促反應的最適溫度均為50℃,并均有熱激活現(xiàn)象,熱激活溫度均為60℃;耐熱實驗表明,酶Ⅰ和酶Ⅰ′在最適溫度下溫育45min后,酶活力分別為最高酶活力的60.2%和57.3%,酶Ⅰ在溫育20min時表現(xiàn)最大活性,酶Ⅰ′在溫育25min時表現(xiàn)最大活性;酶Ⅰ和酶Ⅰ′在60℃保溫25min活力分別下降至最大活力... 更多
基金：“泰山學者”建設專項； 山東省自然科學基金(No.ZR2010CL020)；
關鍵詞：斑玉蕈; 酸性磷酸酯酶; 動力學特性; 酶活力;