【作者】余淑英;盧艷;王星麗;瞿亮;孫培龍;張安強(qiáng);
【機(jī)構(gòu)】浙江工業(yè)大學(xué)食品科學(xué)技術(shù)系;杭州百山祖生物科技有限公司;
【摘要】經(jīng)優(yōu)化乙酰膽堿酯酶抑制劑的篩選條件,結(jié)合體外乙酰膽堿酯酶的活性,篩選出具有抗阿爾茨海默的高抑制活性的均一金針菇子實(shí)體多糖組分;采用改良的Ellman法,建立乙酰膽堿酯酶抑制劑的篩選系統(tǒng),考察其最大吸收波長(zhǎng)、ACh E的濃度、ATCI的濃度、顯色劑DTNB的濃度,以及反應(yīng)體系的時(shí)間對(duì)系統(tǒng)的影響,最終確定反應(yīng)體系的最佳條件為:酶反應(yīng)體系的反應(yīng)溫度37℃,反應(yīng)時(shí)間30 min,最佳檢測(cè)波長(zhǎng)412 nm,ACh E的濃度0.05 u/m L,ATCI的濃度0.10 mmol/L,p H=8.0的100 mmol/L PBS緩沖溶液,顯色劑DTNB終濃度0.066 7mmol/L,通過(guò)乙酰膽堿酯酶抑制劑的篩選發(fā)現(xiàn)了金針菇多糖抑制劑。
【關(guān)鍵詞】金針菇多糖; 乙酰膽堿酯酶抑制劑; 篩選條件優(yōu)化;