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    實時熒光定量PCR檢測球孢白僵菌熱休克蛋白基因hsp70在幾種脅迫條件下的表達


    【發(fā)布日期】:2019-01-10  【來源】:菌物學(xué)報
    【作者】謝翎 陳紅梅 湯強 蒲順昌 李增智 黃勃
    【機構(gòu)】安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)微生物防治省重點實驗室 安慶師范學(xué)院生命科學(xué)系
    摘要:本研究運用Realtime-PCR技術(shù),對球孢白僵菌Beauveria bassiana hsp70基因在不同脅迫條件下的表達情況進行了檢測。從mRNA轉(zhuǎn)錄水平探討了不同脅迫條件對球孢白僵菌hsp70基因表達的影響。結(jié)果表明:38℃高溫脅迫下,30min時表達量達到最高峰,為對照樣品的10.18倍。隨后表達量開始下降,至180min時,其表達量降為最低,為對照樣品的2.85倍;4℃低溫脅迫下,2h檢測到hsp70的表達量下降至最低點,為對照樣品的0.25倍。隨后表達量開始回升,至10h表達量始終維持在對照樣品的1.4-1.5倍左右;紫外脅迫下(波長253.7nm),3min后hsp70的表達量快速上升至最高峰,為對照樣品的2.33倍。隨后表達量迅速下降,至60min表達量始終維持在對照樣品的0.2倍左右。因此推測,hsp70基因在球孢白僵菌抵抗高溫、低溫和紫外三種脅迫方面都可能具有重要作用。同時研究結(jié)果也表明,球孢白僵菌hsp70基因啟動子在逆境下可引導(dǎo)基因高效表達,因而在抗逆工程菌株構(gòu)建方面可能具有重要的應(yīng)用價值。
    基金:國家“863”項目(No.2006AA10A212); 新世紀優(yōu)秀人才支持計劃(No.05-0560); 安徽省優(yōu)秀青年科技基金(No.08040106902); 安徽省級自然科學(xué)研究重點項目(No.TD200708);
    關(guān)鍵詞:昆蟲病原真菌; 基因表達定量分析; Taqman探針;
     
     
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