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    粗毛栓菌誘變菌株SAH-12漆酶的分離純化及酶學(xué)性質(zhì)研究


    【發(fā)布日期】:2018-08-20  【來(lái)源】:菌物學(xué)報(bào)
    【作者】黃乾明 楊婉身 陳華萍 張寒飛 劉一江 謝君
    【機(jī)構(gòu)】四川農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)與理學(xué)院華南農(nóng)業(yè)大學(xué)測(cè)試中心 雅安625014廣州510642
    【摘要】粗毛栓菌Trametes gallica誘變菌株SAH-12是通過(guò)紫外誘變選育所得的漆酶高產(chǎn)菌株,Active-PAGE分析表明SAH-12在高氮低碳無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)液(LM3)中至少分泌3種漆酶同工酶(Lac1、Lac2、Lac3)。采用硫酸銨鹽析、透析和Sephadex-G75分子篩層析從其培養(yǎng)液中分離純化得到電泳純的Lac1,純化倍數(shù)6.54,酶活性回收59.7%。Lac1經(jīng)SDS-PAGE驗(yàn)證為一條帶,其表觀分子量為61.5kDa。Lac1為一種糖蛋白,含糖量11.6%,等電點(diǎn)pI4.40,催化氧化底物ABTS的最適反應(yīng)溫度為60℃,最適pH為2.6,Km值為25μmol/L。Lac1在40℃(pH4.0)以下和pH1.5~5.0(28℃)范圍內(nèi)穩(wěn)定。金屬離子Fe2+、Ag+、Hg2+和Cr3+與抑制劑DTT、SDS、EDTA和DMSO對(duì)Lac1有抑制作用,其中Fe2+和DTT完全抑制酶活,而Cu2+對(duì)酶有明顯激活作用,Mn2+、Zn2+對(duì)酶活影響不大。Lac1不僅可使一些合成染料明顯脫色,而且對(duì)蘋(píng)果汁多酚祛除也有較好效果。40℃用該酶(1U/mL)處理蘋(píng)果汁5h,其多酚含量可降低40%。 
    【基金】四川省教育廳重點(diǎn)科研項(xiàng)目(No.2002A009,No.2004A026); 四川省科學(xué)技術(shù)廳應(yīng)用基礎(chǔ)項(xiàng)目(No.04JY029-032); 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)青年科技創(chuàng)新基金(No.00731200);
    【關(guān)鍵詞】合成染料; 脫色; 蘋(píng)果汁; 多酚;
     
     
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