【作者】邵彥春 王汝毅 丁月娣 陳福生 謝筆鈞
【機(jī)構(gòu)】華中農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科技學(xué)院 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科技學(xué)院 武漢430070
【摘要】以農(nóng)桿菌EHA105為介導(dǎo),將帶有潮霉素抗性基因和gus基因的T-DNA片段轉(zhuǎn)化到紅色紅曲菌(Monascusruber)中。通過(guò)轉(zhuǎn)化條件的優(yōu)化,成功構(gòu)建了含有5132個(gè)轉(zhuǎn)化子的T-DNA插入突變庫(kù)。根據(jù)菌落顏色與色素分泌情況篩選到50株色素突變子,聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)表明上述突變子均有T-DNA片段插入。經(jīng)5代的繼代培養(yǎng)后,94%的突變子具有穩(wěn)定性(潮霉素抗性)。對(duì)突變子產(chǎn)色素和桔霉素能力的分析表明其分泌次生代謝產(chǎn)物的能力發(fā)生了較大變化。本方法的建立,為進(jìn)一步深入研究紅曲菌的代謝調(diào)節(jié)和基因功能奠定了基礎(chǔ)。
【基金】湖北省科技廳資助項(xiàng)目(2001AA214B03);
【關(guān)鍵詞】紅色紅曲菌; 表型; 桔霉素;