【作者】陳福生 周啟 羅信昌 李書謙 王愛華 路磊
【機(jī)構(gòu)】上教育部農(nóng)業(yè)微生物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 農(nóng)業(yè)部食品安全評價(jià)重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室 華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 教育部農(nóng)業(yè)微生物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 農(nóng)業(yè)部食品安全評價(jià)重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室 華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 農(nóng)業(yè)部食品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測試中心華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 農(nóng)業(yè)部食品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測試中心 華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 農(nóng)業(yè)部食品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測試中心 華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 武漢430070,武漢430070,武漢430070,武漢430064,武漢430064,武漢430064
【摘要】以黃曲霉毒素B1(AFB1)與牛血清蛋白(BSA)的連接物AFB1-BSA注射免疫兔子獲得抗AFB1抗血清,經(jīng)(NH4)2SO4沉淀、酶切處理與親和層析分離純化后,得到抗AFB1獨(dú)特型抗體Ab1及其酶切片段Fab1,然后再將Fab1注射免疫BALB/c小鼠,得到抗(抗AFB1)獨(dú)特型抗體Ab2及其酶切Fab2。研究了Ab2和Fab2的性質(zhì),結(jié)果表明,Ab2和其Fab2都僅與Ab1及其Fab1反應(yīng),而不和抗桔霉素等其他抗體反應(yīng),有較好的特異性。以AFB1與卵清蛋白(OV)的連接物AFB1-OV為包被抗原,Fab1為反應(yīng)抗體,Ab2和Fab2為競爭抗原,達(dá)到50%的競爭抑制率時(shí),Ab2和Fab2的濃度分別為3.98ug/ml和1.12ug/ml;而以Ab2和Fab2為包被抗原,Fab1為反應(yīng)抗體,AFB1為競爭抗原,達(dá)到50%的競爭抑制率時(shí),AFB1的濃度分別為44.67ug/L和6.31ug/L,這表明無論是Ab2還是Fab2都和AFB1有很好的內(nèi)影像關(guān)系,可以作為AFB1的替代品用于AFB1的免疫學(xué)檢測。但是相對而言,由于Fab2的分子量小,反應(yīng)時(shí)的空間位阻小,所以Fab2更適合于用作AFB1的替代品。
【基金】湖北省科技廳重點(diǎn)課題(992p0321); 教育部農(nóng)業(yè)微生物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開放課題(AML99023);
【關(guān)鍵詞】黃曲霉毒素B1-牛血清蛋白(AFB1-BSA)連接物; 抗原; 親和層析;