【作者】王富強(qiáng) 任志紅 徐平 趙穎 修建新 朱研研 賀秉坤
【機(jī)構(gòu)】華北制藥集團(tuán)新藥研究開發(fā)有限責(zé)任公司 華北制藥集團(tuán)新藥研究開發(fā)有限責(zé)任公司 石家莊050015中科院遺傳與發(fā)育生物學(xué)研究所北京100101石家莊050015
【摘要】以腐草霉素(phleomycin)抗性為選擇標(biāo)記,構(gòu)建了用于青霉素生產(chǎn)菌—產(chǎn)黃青霉Penicillium chrysogenum的轉(zhuǎn)化載體pPIPKA。 以此轉(zhuǎn)化當(dāng)前的青霉素生產(chǎn)菌株NCPC-10086,建立了高效的工業(yè)生產(chǎn)菌株的基因轉(zhuǎn)化體系,轉(zhuǎn)化效率最高達(dá)18個轉(zhuǎn)化子/g DNA。對轉(zhuǎn)化子進(jìn)行了PCR及Southern雜交分析,結(jié)果表明,外源基因整合到了宿主的染色體上。
【基金】國家科技攻關(guān)計劃(2002BA711A16); 國家技術(shù)創(chuàng)新項目計劃資金資助;
【關(guān)鍵詞】基因轉(zhuǎn)化; 顯性選擇標(biāo)記; 腐草霉素;