【作者】楊星勇 王中康 夏玉先 盧曉風(fēng) 裴炎

【機構(gòu)】西南農(nóng)業(yè)大學(xué)生物技術(shù)中心；

【摘要】以幾丁質(zhì)為底物，加入基本鹽培養(yǎng)基中，誘導(dǎo)球孢白僵菌（Beauveriabassiana）產(chǎn)生分解昆蟲表皮的蛋白酶。誘導(dǎo)物中，蟬蛻誘導(dǎo)的蛋白酶總活性、比活較高，經(jīng)超濾、離子交換層析、親和層析、制備性IEF電洗脫純化了一種有凝乳彈性蛋白酶（Pr1）活性的蛋白酶BbPr1。經(jīng)SDS－PAGE電泳銀染后是單帶，HPLC凝膠過濾顯示單峰。BbPr1為單體酶，分子量為33.6kD左右，pI為7.4。底物專一性測定顯示，BbPr1能水解Phe或Leu形成的酸胺鍵和肽鍵。BbPrl可被PMSF抑制，表明其活性中心有Ser殘基；BbPr1還可被胰凝乳蛋白酶抑制劑TPCK和凝乳彈性蛋白酶抑制劑TEI等所抑制;胰蛋白酶抑制劑beupeptin和Epianstatin，及胃蛋白酶抑制劑Pepstain對BbPr1活性無影響。還研究了BbPr1的最適作用pH和pH穩(wěn)定性。 

【基金】國家自然科學(xué)基金；

【關(guān)鍵詞】球胞白僵菌; 昆蟲病原真菌; 凝乳彈性蛋白酶; 純化; 特性;