【作者】劉巍峰;高東;王祖農(nóng);
【機構】山東大學生命科學學院微生物技術國家重點實驗室!濟南 250100;
【摘要】把大腸桿菌β-半乳糖苷酶基因克隆到帶有酵母半乳糖可誘導啟動子GAL1的穿梭表達質(zhì)粒pYESZ中,并把得到的重組質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)化到兩種不同遺傳性狀的宿主菌中,其中一株菌為蛋白酶活性缺失90%以上的pep4-3突變菌株。通過比較兩株重組菌產(chǎn)生的β-半乳糖苷酶活性水平發(fā)現(xiàn)在所述實驗條件下,蛋白酶缺失突變菌株中產(chǎn)生的β-卜半乳糖苷酶活水平不僅均要高于另一對照菌株,并且pep4-3突變菌株表現(xiàn)出受葡萄糖阻遏的嚴緊程度高及對誘導反應迅速等特點。此外,帶有重組質(zhì)粒的pep4-3突變菌株在葡萄糖阻遏培養(yǎng)基中最大生長量和重組對照菌株基本相同,但β-半乳糖苷酶在pep4-3突變菌株中的表達對細胞生長的影響明顯小于對照菌株。
【關鍵詞】釀酒酵母;β-半乳糖苷酶基因;GAL1啟動子;誘導表達;
【基金】國家教委博土點基金;
【分類號】Q936;