【作者】楊依軍;李多川;嚴(yán)琨;彭友良;沈崇堯;
【機(jī)構(gòu)】天津市植物保護(hù)研究所!天津 300112;山東農(nóng)業(yè)大學(xué)植保系!山東泰安 271018;中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)植物科技學(xué)院!北京 100094;
【摘要】嗜熱真菌ThermomyceslanuginosusA236在液體培養(yǎng)基中50℃下靜止培養(yǎng)14天,粗提酶液經(jīng)硫酸銨分級(jí)沉淀、DEAE-Toyopearl離子交換層析、Butyl-Toyopearl疏水層析、SephacrylS100凝膠過濾和FPLCMonoQ離子交換層析,得到了凝膠電泳均質(zhì)的葡萄糖淀粉酶。酶促反應(yīng)產(chǎn)物經(jīng)TLC分析為葡萄糖,證明純化的酶為葡萄糖淀粉酶(EC3.2.1.3)。SDS-PAGE測(cè)定其分子量為72,000,不具亞基,PI為4.0,富含Val和Leu。酶反應(yīng)最適溫度和pH分別為70℃和5.0。在pH5.0條件下,酶在60℃保溫1h,仍具有原酶活性。酶活性在70℃和80℃的半衰期分別為20min和6min。Ca2+對(duì)酶有激活作用,F(xiàn)e3+、Al3+、Hg2+等金屬離子對(duì)酶活力有一定的抑制作用。純酶碳水化合物含量為12.4%。純酶可水解可溶性淀粉、直鏈淀粉、支鏈淀粉、糊精、糖原、麥芽三糖和麥芽糖,其中可溶性淀粉為最適底物。
【關(guān)鍵詞】嗜熱真菌;Thermomyceslanuginosus;葡萄糖淀粉酶;
【基金】國(guó)家教委高校博士點(diǎn)基金;
【分類號(hào)】Q949;