【作者】張渝英;劉年娟;帥克;楊開(kāi)宇;
【機(jī)構(gòu)】中國(guó)科學(xué)院微生物研究所;中國(guó)科學(xué)院微生物研究所;北京;北京;北京師范大學(xué)84屆畢業(yè)生;
【摘要】從酵母變異株20B-12經(jīng)過(guò)超聲波處理、硫酸銨沉淀、DEAE纖維素、磷酸纖維素和DEAE-Sephadex層析等步驟,純化依賴(lài)于DNA的RNA聚合酶B,在聚丙烯酰胺凝膠電泳中呈二條有聚合酶B活力的區(qū)帶。其中不含有DNase、RNase和蛋白酶活力,無(wú)內(nèi)源DNA。50μg/ml的α-鵝膏蕈堿抑制聚合酶活力達(dá)90%以上。最適(NH4)2SO4濃度為40mM。最適Mn2+濃度為2mM。Mg2+對(duì)酶B無(wú)激活作用。變性DNA對(duì)酶B較天然DNA有更高的效率。
【關(guān)鍵詞】依賴(lài)于DNA的RNA聚合酶;釀酒酵母變異株20B-12;RNA聚合酶的純化;