【作者】 申進(jìn)文; 李芳; 薛元; 段慶虎; 申曉曄; 邱立友; 戚元成;
【Author】 SHEN Jinwen;LI Fang;DUAN Qinghu;SHEN Xiaoye;XUE Yuan;QIU Liyou;QI Yuancheng;College of Life Science,Henan Agriculture University;
【機(jī)構(gòu)】 河南農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【摘要】 利用反轉(zhuǎn)錄PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)克隆糙皮側(cè)耳(Pleurotus ostreatus)幾丁質(zhì)酶基因PoChi1,將其克隆至原核表達(dá)載體,得重組質(zhì)粒pEASY-PoChi1,轉(zhuǎn)化至大腸桿菌Escherichia coli BL21(DE3);通過半定量RT-PCR分析該基因在糙皮側(cè)耳不同發(fā)育階段的表達(dá)。糙皮側(cè)耳幾丁質(zhì)酶基因PoChi1序列長度為1188bp,編碼395個氨基酸,N端24個氨基酸為信號肽。經(jīng)IPTG誘導(dǎo)后SDSPAGE檢測,該基因編碼產(chǎn)物的相對分子量約為29kDa。PoChi1在糙皮側(cè)耳成熟子實(shí)體期的表達(dá)量最高。 更多還原
【關(guān)鍵詞】 幾丁質(zhì)酶基因; RT-PCR; 糙皮側(cè)耳; 原核表達(dá); 表達(dá)模式;
【文內(nèi)圖片】
【基金】 國家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系(編號:CARS-24)專項(xiàng);河南省農(nóng)業(yè)攻關(guān)項(xiàng)目(編號:122102110044)的部分研究內(nèi)容