【作者】 徐軍偉； 趙蔚； 鐘建江；

【機(jī)構(gòu)】 華東理工大學(xué)生物反應(yīng)器工程國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室； 上海交通大學(xué)微生物代謝國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室；

【摘要】 靈芝細(xì)胞在液體靜置和振蕩培養(yǎng)方式下,抗癌物質(zhì)靈芝酸的產(chǎn)量有顯著的差別。采用抑制消減雜交法分離了靈芝細(xì)胞在兩種不同培養(yǎng)方式下差異表達(dá)的基因,對(duì)構(gòu)建的差減文庫進(jìn)行篩選后獲得了一個(gè)靈芝的EST序列。根據(jù)這個(gè)EST序列,采用RACE-PCR的方法成功克隆到了靈芝G蛋白β亞基（Gb）基因（GenBank登錄號(hào)GQ293361）。序列分析顯示這個(gè)基因cDNA全長(zhǎng)1217bp,編碼了313個(gè)氨基酸。同源性分析表明其編碼的氨基酸與其他蘑菇類真菌Gβ的氨基酸序列同源性較高,與Coprinopsis cinerea（XP001830441.1）、Lentinula edodes（AAP13580.2）和Schizophyllum commune（XP003029882.1）的一致性分別達(dá)到91%、91%和90%。實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果表明這個(gè)基因在液體靜置培養(yǎng)方式下的表達(dá)量顯著高于振蕩培養(yǎng)。

【關(guān)鍵詞】 靈芝G蛋白β亞基； 差異表達(dá)；
 
【基金】 國(guó)家自然科學(xué)基金“靈芝真菌液體靜態(tài)培養(yǎng)過程中靈芝酸積累的調(diào)控研究”(20776084)

【分類號(hào)】S567.31