易菇網(wǎng)訊：“不同種質(zhì)植物之間的微衛(wèi)星DNA片段會(huì)產(chǎn)生較為明顯的差異性，可以用于區(qū)分不同種或者同種不同個(gè)體；多態(tài)性高，特異性強(qiáng)，區(qū)分度好，開(kāi)發(fā)難度大；目前DNA指紋鑒定圖譜技術(shù)已經(jīng)廣泛的應(yīng)用于中藥鑒定領(lǐng)域。”11月24日下午，在2018第六屆全國(guó)天麻會(huì)議“天麻‘兩菌一種’發(fā)展高峰論壇”環(huán)節(jié)，陜西理工大學(xué)周天華博士在報(bào)告中講到。他向與會(huì)代表分享了天麻種質(zhì)資源的DNA指紋圖譜研究。

　　天麻為蘭科天麻屬植物，依據(jù)天麻花序軸顏色不同可分為5個(gè)變型：紅天麻、綠天麻、烏天麻、黃天麻與松天麻。“不同天麻的變型天麻素差異顯著，主要藥用活性成分為天麻素（對(duì)-羥甲基苯-β-D-吡喃葡萄糖），不同種質(zhì)間天麻素含量差異較大；不同變型間的天麻塊莖在形態(tài)上幾乎沒(méi)有差異，難以從形態(tài)學(xué)上準(zhǔn)確區(qū)分，給種質(zhì)資源鑒定、良種選育、加工和臨床用藥等帶來(lái)很大的困難；亟需利用DNA分子鑒定的方法，為該藥材良種選用及用藥安全提供重要技術(shù)支撐。”會(huì)上，周天華分表示。

　　談及DNA指紋圖譜與分子鑒定技術(shù)問(wèn)題，周天華表示：“不同個(gè)體都具有獨(dú)一無(wú)二的DNA組成；DNA指紋圖譜技術(shù)是通過(guò)研究不同個(gè)體的特定DNA片段，用于個(gè)體識(shí)別，鑒定親緣關(guān)系，遺傳育種等；常見(jiàn)的DNA指紋圖譜（分子標(biāo)記）RAPD, RFLP, AFLP, ISSR, SSR, SNP。微衛(wèi)星DNA（Microsatellite DNA）也稱為簡(jiǎn)單重復(fù)序列（simple sequence repeats, SSRs），是由1~6bp的重復(fù)單元串聯(lián)而成一段DNA，并且廣泛的分布于核基因組與葉綠體基因中；不同種質(zhì)植物之間的微衛(wèi)星DNA片段會(huì)產(chǎn)生較為明顯的差異性，可以用于區(qū)分不同種或者同種不同個(gè)體；其多態(tài)性高，特異性強(qiáng)，區(qū)分度好，開(kāi)發(fā)難度大；目前DNA指紋鑒定圖譜技術(shù)已經(jīng)廣泛的應(yīng)用于中藥鑒定領(lǐng)域。”他還強(qiáng)調(diào)，本研究旨在開(kāi)發(fā)天麻微衛(wèi)星分子標(biāo)記，為天麻的良種選育與用藥安全提供技術(shù)支撐。

　　會(huì)上，周天華還介紹了研究思路與方法。他講到，在陜西、湖北、云南、貴州四個(gè)產(chǎn)地采集天麻烏、紅、綠3種變型，共計(jì)12個(gè)種群，120個(gè)個(gè)體；通過(guò)二代測(cè)序技術(shù)，建立基因組文庫(kù)，篩選微衛(wèi)星片段，建立天麻微衛(wèi)星文庫(kù)；對(duì)天麻的微衛(wèi)星文庫(kù)進(jìn)行特征分析，利用軟件開(kāi)發(fā)天麻SSR引物60多對(duì)，對(duì)60多引物對(duì)部分樣本的PCR擴(kuò)增與聚丙烯酰胺凝膠電泳，篩選出具有較高多態(tài)性的引物；最后利用所篩選的引物對(duì)120個(gè)樣本進(jìn)行擴(kuò)增與檢查；統(tǒng)計(jì)條帶，建立天麻SSR指紋鑒定圖譜。其中，120個(gè)天麻樣本中共檢測(cè)出有112種基因型組合；絕大多數(shù)個(gè)體有特異基因型，共享基因型的僅發(fā)生在種群內(nèi)；表明微衛(wèi)星分子標(biāo)記在個(gè)體水平上有較高的鑒定效率。

　　最后，周天華總結(jié)了該研究成果，一是開(kāi)發(fā)了天麻微衛(wèi)星分子標(biāo)記1套，共20對(duì)，特異性強(qiáng)，多態(tài)性高；二是天麻的遺傳多樣性高與遺傳分化強(qiáng)烈；三是微衛(wèi)星分子標(biāo)記的鑒定效率高。應(yīng)用前景包括種質(zhì)資源鑒定、良種選育、混偽品鑒定、物種保護(hù)、標(biāo)志性特征構(gòu)建及DNA指紋圖譜構(gòu)建。

　　2018第六屆全國(guó)天麻會(huì)議暨寧強(qiáng)第二屆天麻貿(mào)易洽談會(huì)由中國(guó)菌物學(xué)會(huì)主辦，中共寧強(qiáng)縣委、寧強(qiáng)縣人民政府、易菇網(wǎng)、中國(guó)菌物學(xué)會(huì)菌物產(chǎn)業(yè)分會(huì)、陜西理工大學(xué)共同承辦，由陜西省食藥用菌工程技術(shù)研究中心、貴州烏蒙騰菌業(yè)有限公司、諸城市良工機(jī)械有限公司、陜西漢中思青科技農(nóng)業(yè)開(kāi)發(fā)有限公司、寧強(qiáng)縣真菌研究所、西鄉(xiāng)縣天麻研究所協(xié)辦，并得到了陜西慶瑞豐食藥用菌科技有限公司、陜西森盛菌業(yè)科技有限公司、西鄉(xiāng)縣食用菌研究所、漢中市永誠(chéng)塑業(yè)有限公司、岳西縣俊峰機(jī)械加工廠、岳西縣岳工機(jī)械有限公司、安徽財(cái)萱新能源有限公司、安徽綠星節(jié)能科技有限公司、德江縣綠通天麻發(fā)展有限公司、略陽(yáng)縣榮昌食用菌種植農(nóng)民專業(yè)合作社、安徽省金寨縣宏志天麻專業(yè)合作社的大力支持。本次會(huì)議除主旨報(bào)告外，還舉行有天麻“兩菌一種”發(fā)展高峰論壇、天麻藥食同源產(chǎn)業(yè)發(fā)展高峰論壇、天麻產(chǎn)業(yè)精準(zhǔn)扶貧經(jīng)驗(yàn)交流會(huì)、新產(chǎn)品新技術(shù)交流會(huì)、中國(guó)（漢中·寧強(qiáng)）天麻產(chǎn)業(yè)發(fā)展高峰論壇，以及天麻產(chǎn)業(yè)博覽會(huì)，會(huì)議同期還舉行了良工機(jī)械天麻行業(yè)客戶答謝晚宴，慶瑞豐招商推介會(huì)暨客戶聯(lián)誼會(huì)以及參觀西鄉(xiāng)縣食用菌研究所等活動(dòng)。第六屆全國(guó)天麻會(huì)議在寧強(qiáng)的召開(kāi)，為我國(guó)天麻主產(chǎn)區(qū)產(chǎn)業(yè)升級(jí)，助推扶貧起到極大作用，也將成為天麻產(chǎn)業(yè)具有歷史意義的一次盛會(huì)。