易菇網(wǎng)訊：“建議生產(chǎn)用蟲草類真菌不僅需要形態(tài)鑒定，還需要采用分子生物學(xué)手段鑒定到種和菌株。”10月26日，在2018第二屆全國蟲草大會(huì)“泛亞·蟲草產(chǎn)業(yè)發(fā)展高峰論壇”環(huán)節(jié)中，浙江泛亞生命科學(xué)研究院副院長李春如在談及菌株的影響問題時(shí)說道。會(huì)上，李春如從菌（種）株、質(zhì)量控制、研發(fā)思路和策略探討等方面向與會(huì)代表介紹了藥食用蟲草類真菌在研發(fā)和生產(chǎn)過程中等遇到的相關(guān)問題。
“菌種的影響是非常重大的，以食用安全性為例，不同真菌物種因?yàn)楦髯曰虿町?，其編碼的產(chǎn)物千差萬別。有些具營養(yǎng)保健功能，而有些真菌堪稱毒藥，如毒蘑菇，真菌的產(chǎn)毒素是由基因所控制，其產(chǎn)毒素能力受真菌種類及菌株、基物類型、環(huán)境條件等因素影響。”李春如表示，產(chǎn)生毒素的真菌種類主要有曲霉菌屬（Aspergillus）、鐮刀菌屬（Fusarium）、青霉屬（Penicillium）這三類真菌。
李春如還向現(xiàn)場的代表介紹了三種真菌的相關(guān)情況。他表示，很多曲霉菌引起農(nóng)產(chǎn)品、食品和飼料發(fā)霉變質(zhì)，共有15種曲霉菌產(chǎn)生24種毒素。以黃曲霉菌最為普遍，且所產(chǎn)毒素毒性最大，具強(qiáng)烈的致癌性，產(chǎn)生的毒素主要是香豆素類和丁烯酸內(nèi)酯化合物以前者最多；鐮刀菌本屬真菌分布甚廣，且多為腐生，但有不少種是重要的植物病原菌，也有少數(shù)是人和動(dòng)物的條件致病菌，其中有16種鐮刀菌產(chǎn)生18種毒素，主要是酚大環(huán)內(nèi)酯和單端霉烯族化合物，以后者最多；青霉菌本屬真菌，種類多，分布極廣。青霉菌有很大經(jīng)濟(jì)價(jià)值，許多是有害菌，引起糧食、食品、飼料、水果霉變，共有28種青霉菌產(chǎn)生34種毒素，尤以米上最多，其次是谷類及制成品，如餅，醬團(tuán)和飼料。毒素種類及化學(xué)組成最多，主要是蒽醌、丁烯酸內(nèi)酯、環(huán)氯肽、吡喃酮及吡喃結(jié)構(gòu)的化合物。“除了這三種之外，還有麥角菌、稻曲病菌、綠色木霉、交鏈孢、葡萄穗狀霉、漆斑霉菌、長蠕孢霉，球毛殼菌、絲核菌、節(jié)卵斑霉、頭孢霉、交鏈孢、粉紅單端孢霉、黑附球霉和芽枝霉等其它產(chǎn)毒真菌。”
報(bào)告中，李春如表示蟲草類真菌在栽培過程中會(huì)受到其它真菌的污染或者原料帶入，需要對(duì)栽培過程進(jìn)行精確控制、有效防控污染、進(jìn)行全程監(jiān)控、沉降菌檢測(cè)、和相關(guān)真菌毒素的檢測(cè)。另外，由于上游菌種鑒定方面的原因，有時(shí)不能正確區(qū)分標(biāo)稱的蟲草類真菌與其近似種的親緣關(guān)系，有潛在的健康威脅。
在談及菌株的影響問題時(shí)，李春如認(rèn)為同一菌種不同菌株間常表現(xiàn)出遺傳多樣性，其代謝產(chǎn)物也有明顯差異。同一種產(chǎn)毒素真菌，菌株間產(chǎn)毒的差異很大，如產(chǎn)黃曲霉毒素的黃曲霉菌不是所有菌株都產(chǎn)毒，據(jù)Matles報(bào)導(dǎo)，自然界中的野生菌株只有10%能產(chǎn)毒素。禾谷鐮刀菌菌株間產(chǎn)毒素的能力也存在很大差異，對(duì)原四川11個(gè)代表菌株產(chǎn)生二種毒素量的研究結(jié)果表明最高的是最低的十倍。以高雄山蟲草為例，供試的兩個(gè)來源于中國的菌株表現(xiàn)出急性毒性，而韓國的菌株栽培的高雄山蟲草（韓國又稱雪花蟲草）獲得了韓國的新食品原料證書，獲準(zhǔn)上市銷售。“針對(duì)這種情況，建議生產(chǎn)用蟲草類真菌不僅需要形態(tài)鑒定，還需要采用分子生物學(xué)手段鑒定到種和菌株。”
報(bào)告中，李春如還向與會(huì)代表介紹了同一菌株的傳代次數(shù)及退化的影響。他講到，同一菌株在不同培養(yǎng)工藝中其代謝組差異較大，除此之外，即使是同一工藝隨著傳代次數(shù)的增加，不僅在菌落形態(tài)和生長速率等生物學(xué)性狀上表現(xiàn)異常，而且在產(chǎn)孢梗束能力和目標(biāo)活性物質(zhì)產(chǎn)量等生產(chǎn)性狀也出現(xiàn)下降的退化現(xiàn)象。對(duì)蟬花在人工培養(yǎng)基上繼代培養(yǎng)菌株的生物學(xué)特性的研究結(jié)果表明：蟬花菌株在人工培養(yǎng)基上繼代培養(yǎng)過程中生物學(xué)性狀表現(xiàn)出階段性的變異，菌株的產(chǎn)孢量隨著傳代次數(shù)的增加而下降，菌絲生長速度先隨傳代次數(shù)增加而加快，第8代之后生長速度減緩。第8、9代是蟬花菌株繼代培養(yǎng)的轉(zhuǎn)折階段。總的來看，繼代培養(yǎng)過程中菌落局變頻率沒有規(guī)律可循，其變異具有菌株的特異性。
“不同的培養(yǎng)基配方對(duì)產(chǎn)毒水平影響顯著。如黃曲霉菌在花生、玉米、堅(jiān)果等種子上產(chǎn)毒素能力最大，但在黃豆種子上則產(chǎn)生毒素少。伏馬毒素在玉米上產(chǎn)毒素多，大米上產(chǎn)毒素低。”談及不同培養(yǎng)條件對(duì)產(chǎn)品的影響問題時(shí)，李春如表示環(huán)境影響產(chǎn)毒菌的生長，也影響產(chǎn)毒量。影響因素有溫度、濕度、CO2、O2等。一般說來，溫度和濕度低可減少毒素，CO2從0.03%到100%，隨CO2增加，毒素含量降低。氧從5% 降到1%可使毒素明顯降低。在溫暖潮濕地區(qū)，花生仁被黃曲霉污染嚴(yán)重，而且產(chǎn)毒菌株的比例高。又如產(chǎn)玉米赤霉烯酮毒素的禾谷鐮刀菌，在變溫條件下25oC培養(yǎng)二周，再在12oC下培養(yǎng)8周產(chǎn)毒量最大。一般環(huán)境濕度大，基物水份含量高，產(chǎn)毒量高。谷物破損嚴(yán)重及霉變程度愈高，農(nóng)產(chǎn)品和食品中的毒素含量愈高，而健康飽滿的小麥抵御產(chǎn)毒菌的侵害越強(qiáng)，帶菌量極少，樣品中檢測(cè)不到真菌毒素。
報(bào)告最后，李春如就泛亞在研發(fā)和生產(chǎn)蟬花過程中如何控制幾個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)做了介紹。他表示，浙江泛亞公司為準(zhǔn)確鑒定對(duì)于采集分離的蟬花菌種做了大量研究，例如采用經(jīng)典的形態(tài)鑒定方法結(jié)合18S rDNA ITS序列比對(duì)保證菌種鑒定的準(zhǔn)確性，應(yīng)用RAPD和SCAR方法對(duì)生產(chǎn)菌株進(jìn)行分子標(biāo)記研究等。他還介紹了泛亞在防菌種變異、退化和復(fù)壯措施以及制定嚴(yán)格的全面質(zhì)量控制的SOP操作規(guī)程，對(duì)關(guān)鍵環(huán)節(jié)重點(diǎn)把控等相關(guān)措施。
2018第二屆全國蟲草大會(huì)于10月25-27日在杭州龍湖皇冠假日酒店舉行，會(huì)議由中國菌物學(xué)會(huì)主辦，真菌學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室、易菇網(wǎng)、中國菌物學(xué)會(huì)菌物產(chǎn)業(yè)分會(huì)、中國菌物學(xué)會(huì)蟲生真菌專業(yè)委員會(huì)、杭州中美華東制藥有限公司承辦，浙江五養(yǎng)堂藥業(yè)有限公司、杭州寶臻生物技術(shù)有限公司、浙江泛亞生物醫(yī)藥股份有限公司協(xié)辦，武漢菌博會(huì)展服務(wù)有限公司承擔(dān)會(huì)務(wù)執(zhí)行。本次大會(huì)圍繞“直面蟲草產(chǎn)業(yè)的挑戰(zhàn)與機(jī)遇”主題，安排有學(xué)術(shù)交流會(huì)，蟲草產(chǎn)業(yè)發(fā)展高峰論壇、冬蟲夏草產(chǎn)業(yè)發(fā)展高峰論壇、蛹蟲草產(chǎn)業(yè)發(fā)展高峰論壇、蟲草產(chǎn)業(yè)企業(yè)家論壇，蟲草產(chǎn)業(yè)新產(chǎn)品新技術(shù)展覽，并組織代表前往杭州中美華東制藥有限公司進(jìn)行參觀，同期還舉行了“中國菌物學(xué)會(huì)蟲草類產(chǎn)業(yè)分會(huì)”成立籌備會(huì)議。本次大會(huì)凝聚了蟲草行業(yè)最權(quán)威的專家以及最具實(shí)力的企業(yè)家，與會(huì)人員提出我國蟲草產(chǎn)業(yè)產(chǎn)值突破千億元指日可待，是蟲草行業(yè)具有歷史意義的一次盛會(huì)。
