硒是人體必需的微量元素,GPX(谷胱甘肽過氧化物酶),家庭,身份證(脫碘酶)和硒蛋白P的家庭,瓦特硒在人體中的重要組成部分,起著重要的生理功能。它已被證明損失的克山病,大骨節(jié)病,癌癥,腫瘤免疫,心血管疾病和腦血管疾病,糖尿病,不孕不育,不孕不育,艾滋病,白內(nèi)障的身體......和其他疾病相關(guān)的人類硒。硒在人體內(nèi)能不能從體外攝入的合成,有研究表明,無機(jī)硒(亞硒酸鈉,硒)是有毒的,它們的使用劑量已有限;有機(jī)硒化合物是無毒或低醫(yī)藥生物技術(shù)作為首選的硒和有機(jī)硒的程度。
靈芝是中國醫(yī)藥和傳統(tǒng)的治療范圍廣泛的藥理活性,補(bǔ)益和藥用歷史超過2000年的寶庫的瑰寶。靈芝是在富含硒的載體,無機(jī)硒的毒理學(xué)安全性優(yōu)秀,身體活動(dòng)和發(fā)揮有機(jī)硒,硒和靈芝固有的顯著協(xié)同吸收率的生理作用。
該研究測(cè)試能力的靈芝是富含硒,選擇菌株的15種含有豐富的硒,富含硒靈芝栽培和液體發(fā)酵的參考。
1材料與方法
1.1靈芝
臺(tái)山紅靈芝(1號(hào)),韓國,靈芝(第2號(hào)),真宗靈芝的G6(第3號(hào)),(4號(hào)),日本,香港智(第5號(hào)號(hào)),日本的水平,治理(6號(hào)),美國巡回大靈芝(7),靈芝(8),甜馳(9)GF(10)(902(11),G3(12),靈芝惠州靈芝(13)克(14),G11的(15),分別從金鄉(xiāng)縣食品的真菌,華中農(nóng)業(yè)大學(xué),山東省,江蘇省,食用菌菌種保藏中心,引用。
1.2試驗(yàn)介質(zhì)
20%的馬鈴薯汁,葡萄糖2%,磷酸氫鉀,0.1%,硫酸鎂0.05%:①和中型掌上電腦之一。瓊脂2%,或000毫升的水。 ②種子培養(yǎng)基:馬鈴薯提取20%,2%的葡萄糖,蛋白胨,酵母提取1%,磷酸二氫鉀(,K2HPO4)0.1%,0.05%硫酸鎂,維生素B1 10毫克/公斤,pH值7.0,水1000毫升。 ③液體發(fā)酵培養(yǎng)基:蔗糖2%,玉米粉,豆粕,2%,磷酸二氫鉀,磷酸氫二鉀(0.1%),硫酸鎂(0.05%),維生素B1 10mg/kg,pH值7.0 L水, 000毫升。
1.3試驗(yàn)方法
1.3.1 PDA平板培養(yǎng)基容忍不同的靈芝中硒的試驗(yàn)種子含有亞硒酸鈉)的濃度分別為0%,0.05%,0.2%,0.5%的PDA平板培養(yǎng)基,28°C間黑暗直到菌絲萌發(fā)后,日常的觀察和測(cè)量菌絲生長和增長率。
13.2液體搖瓶培養(yǎng)靈芝含有豐富的硒測(cè)試靈芝接種種子培養(yǎng)基中,28°C間,140轉(zhuǎn)/分的速度搖動(dòng)塊7天。
接種5%的接種,含有鈉種子解決方案的大小亞硒酸鈉濃度分別為0%,0.05%,0.2%,0.5%的發(fā)酵培養(yǎng)基,28°,速度為140轉(zhuǎn)/分鐘搖晃文化天,硒硒含量的測(cè)定 - 豐富的菌絲體。
1.3.3分析方法
1.3.3.1 4 000轉(zhuǎn)/分15分鐘,除去上清液測(cè)定生物量干重的發(fā)酵液,菌絲離子水洗滌,離心三次,置于60℃干燥烘箱24小時(shí)。
1.3.3.2硒含量的測(cè)定,樣品處理,干燥至恒重菌絲0.1克添加95%濃硫酸10毫升,直至濕潤樣品,加入20毫升混合酸,暖氣,溫度控制是約300℃,約30分鐘。該解決方案是無色,取出50毫升冷卻集容忍的。硒的測(cè)定:生成丹,在酸性溶液中的反應(yīng)(菲律賓?2)混合酸消化后的樣品4,5 - 苯并苤硒腦環(huán)己烷丕硒的鬧心刪除,使用熒光強(qiáng)度熒光分光光度計(jì)激發(fā)光的波長376 nm,發(fā)射波長為520 nm,測(cè)定丕硒腦(3015-19),GBL的參考。
總含有豐富的硒(微克/升),在菌絲體生物量的硒含量(克/升)×菌絲體(微克/克)
2結(jié)果與分析
2.1靈芝靈芝生長在PDA平板培養(yǎng)基含有鈉,如圖1所示亞硒酸鈉結(jié)果。
它可以從圖1看出,亞硒酸鈉液,菌絲生長速度顯著比亞硒酸鈉介質(zhì)更高,菌絲生長速率范圍在500至5000毫克/千克,不同濃度的亞硒酸鈉提高了不同程度的高抑制菌絲生長,這種抑制作用與亞硒酸鈉濃度的增加,高濃度的亞硒酸鈉菌絲生長速度較慢。 13日,14日和7株生長速度快,尤其是在13日(惠州靈芝),在PDA培養(yǎng)基上增長最快,分別為/ D轉(zhuǎn)換0.79厘米,0.66厘米/ D轉(zhuǎn)換和0.58 M / D和硒鈉通過試驗(yàn)觀察發(fā)芽時(shí)間早,菌絲粗壯的特點(diǎn),惠州菌絲株含有亞硒酸鈉媒體的。其他靈芝亞硒酸鈉的耐受性良好。
2.2富含硒的能力來處理不同菌株液體培養(yǎng)
它可以從圖2看出,?靈芝液體培養(yǎng)基中,添加100毫克/公斤和300毫克/千克,500毫克/公斤亞硒酸鈉,亞硒酸鈉液體介質(zhì)不控制,測(cè)試結(jié)果添加100-500毫克/公斤亞硒酸鈉,硒,生物產(chǎn)量降低鈉的含量,低于控制菌絲體生物量生產(chǎn)。 7日和13株靈芝,較高的生物產(chǎn)量的試驗(yàn),添加300mg/kg的亞硒酸鈉,最后1.478g/100ml發(fā)酵生物。因此可以考慮在相同條件下,鈉硒對(duì)第7和13日,時(shí)的應(yīng)變液體培養(yǎng)生物量小于其他菌株。
從圖3可以看出,加入靈芝液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)100 300 500毫克/公斤亞硒酸鈉,不作為控制液體培養(yǎng)基中添加亞硒酸鈉,添加相同濃度的硒,鈉后8 10, 14,特別是在最高13,液體培養(yǎng)菌絲體中的有機(jī)硒含量高,添加有機(jī)硒含量為300毫克/公斤和500毫克/公斤,亞硒酸鈉,菌絲2:386微克/克和2618 G / G來計(jì)算的有機(jī)硒的總含量,分別為3784.2μg/100毫升和3162.5μg/100ml的。