培養(yǎng)純菌種可以分為三個步驟,分別是培養(yǎng)母種,培養(yǎng)原種和培養(yǎng)栽培種。你知道培養(yǎng)純菌種可以用哪些方法嗎?來學(xué)習(xí)一下吧!
一、木棒培養(yǎng)母種
這種方法適用于木耳、香菇和銀耳等生于段木上的食用菌。選出菇最多,生長最好的段木,并將其上出菇最多的一節(jié)鋸下來,長約3厘米,去樹皮。將心木放入75%酒精中消毒2分鐘,用蒸餾水沖洗干凈,用消毒紗布擦干。再用刀縱劈成3厘米長的木條,形狀像火柴棒,棒中長滿了菌絲。用鑷子夾取1條,斜插在試管中馬鈴薯洋菜培養(yǎng)基的斜面上。將試管放在25℃的環(huán)境中培養(yǎng),約30天,菌絲長滿培養(yǎng)基,就可以得到我們需要的母種了。
這個方法有以下幾個特點。第一個,容易感染雜菌。因此,段木用75%酒精消毒后,仍應(yīng)在培養(yǎng)基中加些鏈霉素、青霉素或金霉素等,其用量是每毫升中加30單位(或1000毫升中加40微克),以抑制雜菌。第二個,無性繁殖,菌絲為雙核菌絲。第三個,對銀耳來說,木條中已有兩種菌絲。接種后,銀耳菌絲與香灰菌絲同時生長,香灰菌絲由白色變成淺灰色,培養(yǎng)基由黃變黑,這表明香灰菌絲成熟,而不是雜菌。
二、木塞培養(yǎng)栽培種
用打孔器,在桑、榆、槐、烏柏、重陽木、無患子、栗和懸鈴木等硬木上打孔,取下圓柱形的木塞,直徑約1厘米,長約1.5厘米。將木塞浸入水中24小時,使其吃透水分,再取出瀝水,按其干重的3份比例,加入鋸末培養(yǎng)基2份,拌和均勻。然后進(jìn)行裝瓶,在750毫升的廣口瓶中,可裝木塞200~300個,其間用鋸末培養(yǎng)基填充。在高壓滅菌鍋中加壓滅菌2小時后,放涼,即可接入原種。在25℃的室內(nèi)培養(yǎng)30天,菌絲長滿全瓶,即為栽培種。
木塞栽培種,適用于段木栽培香菇、木耳和銀耳等。如果有意識地選擇直徑10-20厘米的段木,按行距5厘米,株距10厘米的距離,梅花形打孔取木塞,培養(yǎng)成栽培種,則在接種時,將木塞從栽培種瓶中取出來,直接放回原來的孔中,木塞中長滿了菌絲,即生入段木中。菌種瓶中充滿著鋸末培養(yǎng)基,也是栽培種,可在段木上砍花接種。木塞也可以是楔形的,其基部為長方形,1×0.5厘米,長1.5厘米,垂直向下或與段木傾斜約30度。
三、培養(yǎng)銀耳芽孢菌種
銀耳的孢子落在普通的馬鈴薯洋菜培養(yǎng)基上,經(jīng)數(shù)天后,孢子群成為乳白色,半透明,粘稠,邊緣光滑,中央隆起的菌落,這不是菌絲群落,也不是雜菌,而是芽孢菌落。芽孢是真菌繁殖的一種方式,酵母菌就是用芽孢繁殖的,芽孢不能連接成很長的菌絲。如果把這種芽孢菌落轉(zhuǎn)接在試管中的普通馬鈴薯洋菜培養(yǎng)基上,仍生成芽孢菌落。如果將蒸餾水注入到試管中,用接種針將芽孢菌落刮下來成為芽孢懸浮液,將這懸浮液倒入鋸末培養(yǎng)基中,則能發(fā)育成為菌絲,制成原種。
如果在配制馬鈴薯洋菜培養(yǎng)基時,將洋菜增為25克,并加入過磷酸鈣0.3克,以此來增加培養(yǎng)基的濃度和營養(yǎng),則銀耳的孢子在這種培養(yǎng)基上,就能萌發(fā)成菌絲。將芽孢轉(zhuǎn)接在這種培養(yǎng)基上,也能萌發(fā)成菌絲。在普通的馬鈴薯洋菜培養(yǎng)基中,加入銀耳鋸末菌種的煮出液,也能促使銀耳的孢子和芽孢萌發(fā)成菌絲。