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    草菇噬菌體基因文庫的構(gòu)建


    【發(fā)布日期】:2004-11-09  【來源】:
    【核心提示】:草菇噬菌體基因文庫的構(gòu)建TheConstructionofGenomicDNALibraryofVolvariellavolvaceabyLambdaGEM-11Phage李南

    草菇噬菌體基因文庫的構(gòu)建

    The Construction of Genomic DNA Library of Volvariella volvacea by Lambda GEM- 11 Phage

    李南羿 姚占芳 陳明杰 

    摘 要:采用CTAB/NaCl法提取草菇基因組DNA,通過限制性內(nèi)切酶Sau 3AI對純化的草菇基因組DNA進(jìn)行部分酶切,獲得大小為20kb左右的DNA片段.這些DNA片段再次純化后,與經(jīng)Eco R I和Bam H I雙酶切消化的Lambda GEM-11噬菌體DNA載體臂相連,以大腸桿菌(E.coli)LE392為寄主細(xì)胞,構(gòu)建了草菇(Volvariella volvacea)基因文庫,所構(gòu)建基因文庫效價(jià)為1.5×105 pfu/mL.

    關(guān)鍵詞:草菇;噬菌體;基因文庫

    分類號:S646 文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A

    基金項(xiàng)目:本項(xiàng)目由上海市農(nóng)委科技攻關(guān)重點(diǎn)項(xiàng)目資助,項(xiàng)目編號:農(nóng)科攻字(98)第01-14號

    作者簡介:陳明杰,本文的通信作者.Email:mingjiechen@china.com

    作者單位:李南羿(河南農(nóng)業(yè)大學(xué)微生物教研室,鄭州,450002) 

         姚占芳(河南農(nóng)業(yè)大學(xué)微生物教研室,鄭州,450002) 

         陳明杰(農(nóng)業(yè)部食用菌遺傳育種重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室,上海市農(nóng)業(yè)遺傳育種重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室,上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所,上海,201106) 

    參考文獻(xiàn):

    [1]Chang ST, Hayes WA. Volvariella volvacea. New York: Academic Press, 1978. 573~605.

    [2]Graham GC, Henry RJ. Preparation of fungal genomic DNA for PCR and RAPD analysis. New York: R.Springer, 1996. 29~34.

    [3]Chen MJ. Chiu SW. Chang ST. Conrstruction of a genomic library for Volvariella wlvacea.食用菌學(xué)報(bào),1994,1(2):1~4.

    [4]金冬雁,黎孟楓.分子克隆實(shí)驗(yàn)指南.北京:科學(xué)出版社,1992.75~166

     
     
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