林地蘑菇的生物學特性和栽培特性( 2003.09.29)
胡潤芳 黃建成 林衍銓
?(福建省農(nóng)業(yè)科學院耕作所,福州350013)
??1997年,福建省農(nóng)科院植物保護研究所從日本引進了原產(chǎn)巴西的林地蘑菇?(Agaricussilvaticus)?,其藥效比目前栽培的巴西蘑菇?(Agaricusblazei?Murill)更顯著,具有減輕癌癥患者痛苦,使癌細胞縮小,活化免疫功能之功效??[1,2]?。我們繼實驗室箱栽成功后,于1998年春季進行大棚栽培試驗。然后,從栽培大棚床面上取重103g的子實體――菌蓋直徑7.5cm,菌蓋中央菌肉厚1.3cm,菌柄長7.0cm,菌柄中部直徑5.8cm,組織分離后獲一菌株,定名為“林地蘑菇103”。然后對該菌株進行生物學特性和栽培特性研究,現(xiàn)將結果報道如下。
1材料與方法
?1.1供試菌株?林地蘑菇103菌株,為福建農(nóng)科院耕作所選育菌株。
?1.2試驗方法
?1.2.1碳源試驗?在基礎培養(yǎng)基[KH?2PO?41.0g,(NH?4)?2SO?42.0g,MgSO?40.5g,瓊脂20g,水1000mL]中分別加2%葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、淀粉、甲基纖維素作碳源,以基礎培養(yǎng)基為對照,觀察不同碳源對菌絲生長的影響。
?1.2.2氮源試驗?在基礎培養(yǎng)基(葡萄糖20g,KH?2PO?41.0g,MgSO?40.5g,瓊脂20g,水1000mL)中分別加?0.2%?(NH?4)?2SO?4、KNO?3、尿素、蛋白胨、酵母膏、豆餅粉、麩皮作氮源,以基礎培養(yǎng)基為對照,觀察不同氮源對菌絲生長的影響。
?1.2.3溫度試驗?以PDA為供試培養(yǎng)基,設15℃、20℃、25℃、30℃和35℃5個溫度梯度,觀察不同溫度對菌絲生長的影響。
?1.2.4pH試驗?以PDA為供試培養(yǎng)基,以消煮后的pH值為準,設4.2、5.1、5.9、6.5、7.1、8.0和9.1七個pH梯度,觀察不同pH對菌絲生長的影響。
?1.2.5接種培養(yǎng)與數(shù)據(jù)分析?所有試驗均于試管斜面中央接種一塊8mm×5mm的活化菌絲塊,25℃恒溫培養(yǎng)(除溫度試驗外),定期測量菌絲生長速度和生長勢,每一試驗每一處理設5次重復。菌絲長速為平均值,菌絲長勢以菌絲粗細、疏密為據(jù)。
?1.2.6出菇試驗
?1.2.6.1供試培養(yǎng)料箱栽培養(yǎng)料:稻草42%,牛糞45%,麩皮6%,玉米粉5%,碳酸鈣2%,添加石膏1%,糖1%。大棚栽培培養(yǎng)料:稻草70%,牛糞30%,添加過磷酸鈣2.5%,碳酸氫銨2.5%,石膏1%。培養(yǎng)料含水量65%,pH6.5。1m?2用兩瓶麥粒栽培種(每瓶裝干料200g)接種發(fā)菌,菌絲走透后覆土,進行出菇管理。
?1.2.6.2出菇條件箱栽置室溫19~29℃下進行出菇管理,菇房空氣相對濕度保持在80%~90%,每天通風2~3次。大棚栽培管理參閱本文“2.3大棚栽培管理一節(jié)”。
2結果分析
?2.1林地蘑菇103菌株的形態(tài)特征
?2.1.1菌絲形態(tài)特征?在常溫(25℃)下,菌絲在PDA、PSA、麥粒、玉米粒及糞草等培養(yǎng)基上均能正常生長。在斜面培養(yǎng)基上,菌絲生長速度快,旺盛粗壯,白色,爬壁能力強,并有基內(nèi)菌絲生長;在糞草培養(yǎng)基上,菌絲生長速度快,濃密,粗壯有力,潔白。
WX(18,222.1.2子實體形態(tài)特征?原基乳白色,子實體單生或叢生,個大體胖。菇蓋初為乳白色,半球形,成熟時菌蓋中央上凸,邊緣向上微翹,形似“蒙古包”(圖)。菌蓋中央淡褐色,沿邊緣顏色逐漸變淺。菌肉白色,質脆。菌蓋直徑4.0~8.0cm,菌蓋中央菌肉厚度可達1.5cm,沿邊緣漸薄。菌柄中生,近紡錘形,上下近等粗,中部膨大,直徑3.8~6.1cm,菌柄長3.2~7.0cm。菌褶離生,初期為白色,后呈粉紅色至黑褐色,孢子印褐色。
?2.2菌絲生理特征
?2.2.1不同碳源對菌絲生長的影響
?圖林地蘑菇103菌株子實體?FigFruitbody of WTHXA.silvaticus103
該菌株菌絲可利用各種碳源,但不同碳源對菌絲生長的影響顯著不同(表1)。以淀粉為碳源的菌絲長速最快,其次是蔗糖,且菌絲都很健壯。以甲基纖維素為碳源時,菌絲長速和長勢都差。在無碳源的情況下,菌絲也能較快生長,但長勢較弱。因此,淀粉是菌絲生長的最適碳源,蔗糖次之,而甲基纖維素不宜作為該菌株的碳源。
?
表1不同碳源對林地蘑菇菌絲生長速度與生長勢的影響
Table1 Effect of different C?source sonth emycelium growth rateand growth vigor of A.silvaticus
碳源?C-?sources
菌絲生長速度(X±S)1)
Myceliumgrowthrate?(X±S)(mm/d)1)
菌絲長勢2)
Myceliumgrowthvigor
2)?
差異顯著性3)??Significance of difference??3)
0.05
0.01
淀粉Starch
3.6±0.06
+++
a
A
蔗糖Sucrose
3.1±0.6
+++
ab
AB
對照Contro
2.8±0.03
--
b
B
麥芽糖Maltose
2.7±0.04
++
b
B
葡萄糖Glucose
2.6±0.08
++
b
B
甲基纖維素Methylfibre
2.6±0.02
+
b
B
??1)?數(shù)據(jù)為5次重復的平均值The data were the average of five repetitions
???2)?+++表示菌絲長勢最強,++表示菌絲長勢強,+表示菌絲長勢一般,-表示菌絲長勢弱,下同+++represented that them ycelia grew most vigorously,++represented that them ycelia grew vigorously,+represented that them ycelia grew or dinarily,-represented that them ycelia grew weakly,similarly herein after
???3)?F=4.59??**?(F??0.01?=4.10)
?2.2.2不同氮源對菌絲生長的影響?菌絲在以硫酸銨和豆餅粉為氮源的培養(yǎng)基上生長快而健壯,與在其他氮源培養(yǎng)基上的生長速度差異顯著(表2);其次是以酵母膏和蛋白胨為氮源的培養(yǎng)基;而以尿素為氮源時,菌絲不能生長??梢?,硫酸銨和豆餅粉是較理想的氮源,而尿素則不宜選用。
?2.2.3不同溫度對菌絲生長的影響?菌絲在15~35℃范圍內(nèi)都能生長(表3)。在15~30℃范圍內(nèi),隨著溫度上升,菌絲生長速度加快,長勢越來越好;當溫度超過30℃以后,菌絲生長速度減慢,長勢減弱。試驗表明,菌絲生長的適宜溫度為25~30℃。
表2不同氮源對林地蘑菇菌絲生長速度與生長勢的影響?Table2 Effect of different N?source sonth emycelium grow thrateand growthvigorof A.Silvaticus
氮源?N?sources
菌絲生長速度(X±S)?Mycelium grow thrate?(X±S)(mm/d)
菌絲長勢?Mycelium grow thvigor
差異顯著性1)??Significance of difference1)
0.5
0.01
硫酸銨
2.9±0.02
+++
A
A
豆餅粉Soybeanmeal
2.6±0.02
+++
AB
A
酵母膏Yeastexrtact
2.4±0.05
++
AB
AB
蛋白胨Peptone
2.2±0.09
++
BC
AB
硝酸鉀
1.7±0.02
+
C
B
麩皮Wheatbran
1.7±0.02
+
C
B
對照Control
1.6±0.07
+
C
B
尿素Urea
0
???1)?F=17.70??**?(F??0.01?=3.36)
?表3不同溫度對林地蘑菇菌絲生長速度及生長勢的影響
?Table3 Effect of different temperature on them ycelium grow thrate and grow thvigor of A.Silvaticus
測試項目?Itemstested
溫度Temperatures(℃)
15
20
25
30
35
菌絲生長速度Mycelium grow thrate(mm/d)
1.0
1.8
3.5
4.5
0.8
菌絲生長勢Mycelium grow thvigor
+
++
+++
+++
-
?2.2.4不同pH對菌絲生長的影響?菌絲在pH4.2~9.1的范圍內(nèi)均可生長(表4)。pH為4.2時,菌絲生長慢,長勢弱,但在接種20d后,菌絲后期生長較健壯;pH為5.1~7.1時,菌絲生長健壯,長速快;pH為6.5時,菌絲生長速度最快;pH超過8.0,菌絲生長慢,長勢也差??梢姡z生長適宜的pH為pH5.1~7.1,最適pH為6.5。
?表4不同pH對林地蘑菇菌絲生長速度及生長勢的影響
?Table4 Effect of different pH on them ycelium grow thrate and grow thvigor of A.silvaticus
測試項目?Itemstested
pH
4.2
5.1
5.9
6.5
7.1
8.0
9.1
菌絲生長速度Myceliumgrowthrate(mm/d)
1.4
3.4
3.8
4.1
3.5
1.1
0.3
菌絲生長勢Myceliumgrowthvigor
++
+++
+++
+++
+++
+
-
?2.3大棚栽培管理
?2.3.1培養(yǎng)料?用稻草、牛糞、麩皮和玉米粉為培養(yǎng)料進行出菇試驗??[3]?。結果表明,適合子實體生長的培養(yǎng)料是稻草40%~70%,牛糞30%~45%,添加麩皮6%,玉米粉5%,碳酸氫銨?2.5%,?過磷酸鈣2.5%,糖1%和石膏1%。培養(yǎng)料堆制發(fā)酵,經(jīng)二次發(fā)酵后,培養(yǎng)料變成棕褐色,腐熟均勻,無異味,料內(nèi)長滿放射狀的嗜熱性微生物菌落。
?2.3.2接種發(fā)菌?料溫降至30℃即可播種,1m?2用兩瓶麥粒栽培種(每瓶裝干料200g),菌種撒播,輕輕抖入料內(nèi),壓實打平。溫度控制在25~30℃,濕度控制在80%左右,可促進菌絲萌發(fā)與生長。
?2.3.3覆土?菌絲走透培養(yǎng)料后即可覆土。覆土應選用不含肥料、新鮮、保水、通氣性能較好的大土粒。覆土厚度約3~4cm,土要預濕、消毒,含水量以60%~65%為佳,不能過濕。
?2.3.4溫度?箱栽和大棚栽培出菇試驗表明,子實體生長適溫為19~29℃,在20~25℃范圍內(nèi)子實體商品質量最好:健壯、柄粗、蓋厚、不易開傘。原基形成的最低溫度為19℃,低于19℃時,原基難以形成;原基形成的最高溫度為29℃,超過29℃,原基難以形成,已長出的子實體容易開傘、腐爛。林地蘑菇103菌株是一種偏高溫型食用菌,只要根據(jù)當?shù)貧鉁嘏c出菇適溫,室內(nèi)室外栽培均可出菇。
?2.3.5水分?培養(yǎng)料堆制發(fā)酵后含水量大約為60%~70%。偏干和偏濕的培養(yǎng)料都不利于菌絲生長,甚至會導致菌絲失活,不能出菇。空氣相對濕度應保持在80%~90%,濕度過低,原基難以形成,子實體發(fā)育不良;濕度過高,子實體容易水腫,軟爛,極易引起雜菌和害蟲危害。出菇期間要細心管理,根據(jù)土層干濕情況適當噴水,避免將水直接噴在子實體上,并堅持一潮菇噴一次重水。
?2.3.6空氣?播種后3d不通風,待菌絲生長旺盛后逐漸加大通風量。覆土后3~4d不通風,待菌絲爬上粗土時,通風量由小到大。出菇期間,需要充足的氧氣。二氧化碳濃度過高,原基難以形成,子實體發(fā)育不良或停止發(fā)育,容易腐爛和發(fā)生病蟲害。所以,出菇期間必須十分注意通風換氣。
?2.3.7光照?在黑暗條件下,子實體分化發(fā)育較慢,商品質量差,產(chǎn)量低,一定量的散射光有利于子實體的分化和發(fā)育。
?2.3.8采收和加工?菌膜尚未破裂時,應及時采收。采后清除菇腳、死菇、老根并及時補土。停水3~5d后同以上方法管理。林地蘑菇103菌株菇大、菌蓋厚、柄短而粗,采收后鮮菇可制成干品,香味濃郁。
3討論
?林地蘑菇103菌株是一種適合在春秋兩季栽培的偏高溫型食(藥)用菌。根據(jù)福州地區(qū)的氣候條件,春栽4月中下旬播種,秋栽8月下旬至9月上旬播種。由于出菇期是在一年中溫度較高的季節(jié),容易受到雜菌和害蟲危害,所以栽培管理要非常細心。春季同一時間播種,林地蘑菇比巴西蘑菇遲10d左右出菇。林地蘑菇103菌株第一潮菇出菇整齊均勻,鮮菇單朵重一般為45~90g,最重的可達100g以上,每平方米第一潮菇產(chǎn)量一般可達1.5kg~4kg。第一潮菇采收后,春栽易碰上高溫,秋栽易碰上低溫。但管理適當,還可以收第二、第三潮菇。林地蘑菇103菌株作為一種有待進一步開發(fā)的優(yōu)質珍稀食(藥)用菌,其遺傳特性和高產(chǎn)栽培技術尚需進一步研究。
??參考文獻
?[1]林衍銓,李開本,林興生.太陽菇與姬松茸栽培比較及酯酶同工酶分析[J].福建農(nóng)業(yè)學報,16(2)32~35.
?[2]李開本,林衍銓,何修金,等.太陽菇引種試驗初報[J].福建農(nóng)業(yè)科技,1998(5),4~5.