平菇孢子分離復(fù)壯技術(shù)

　　同一平菇品種經(jīng)過四年以上栽培就會(huì)表現(xiàn)出一些退化現(xiàn)象。如出菇遲，長勢弱，轉(zhuǎn)潮慢，產(chǎn)量不高等。通過平菇有性繁殖所產(chǎn)生的孢子進(jìn)行母種繁殖是解決種性退化的一條有效途徑。因平菇子實(shí)體孢子彈射量大，接種操作簡易，在栽培專業(yè)戶中推廣孢子分離提純復(fù)壯技術(shù)是可行的。

１．母種孢子分離與接種

　?。ǎ保┎晒健＿x擇菇體形態(tài)好，生長勢健壯，并能代表該品種性狀接近成熟的平菇子實(shí)體，采摘一叢或兩叢作為復(fù)壯用種菇拿回室內(nèi)備用。要求所采的子實(shí)體菌蓋邊緣稍卷或已接近平展。

　?。ǎ玻┭b置與滅菌。用０．２％新潔爾滅清洗干凈３個(gè)１ ０００毫升燒杯和３個(gè)培養(yǎng)皿，烘干水分后將培養(yǎng)皿放入燒杯底部。切取菌蓋長達(dá)７～９厘米上層或中層的一朵平菇子實(shí)體，用藥棉蘸７５％酒精輕擦菌蓋和菌柄后，將菌褶朝下放入燒杯中的培養(yǎng)皿中?如有插菇鋼絲架更好?。此操作完成后在燒杯口沿上蓋好用無菌水滴濕的４層沙布，上面再蓋一層白紙，用皮筋扎口，以次類推連同３個(gè)同樣處理的燒杯一起放入接種箱。接種箱中另放入３０～４０支ＰＤＡ試管培養(yǎng)基，接種鏟、鑷子酒精燈等工具，用１０毫升甲醛加６克高錳酸鉀混合后對接種箱進(jìn)行熏蒸消毒滅菌。

　?。ǎ常┙臃N與培養(yǎng)。放入接種箱用于孢子分離的平菇，經(jīng)過８～１２小時(shí)后就有孢子彈出，一般放置１晝夜培養(yǎng)皿中就有厚厚一層白色孢子印，這時(shí)要及時(shí)進(jìn)行接種。接種時(shí)雙手用７５％酒精擦洗后就可進(jìn)行。先取掉燒杯口上覆蓋的紙和紗布，再用鑷子夾出平菇體，取出培養(yǎng)皿用左手食指和母指夾住皿體，再取一支試管培養(yǎng)基用左手小指和無名指夾住。右手持接種鏟豎著在酒精燈上灼燒進(jìn)行干熱滅菌，待冷卻后用右手小指及魚際拔出試管棉塞，用接種鏟從培養(yǎng)皿中央鏟取一些孢子接在試管培養(yǎng)基中央，隨即塞上棉塞即可。一朵菇體彈射的孢子量可接種１０支以上試管種。接種完成后貼上標(biāo)簽放入２５℃左右的恒溫箱中培養(yǎng)。培養(yǎng)過程中，前３～４天為孢子定植期，外表看不出任何變化，７天以后孢子開始萌發(fā)并在四周長出白色絨毛狀菌絲體，１６～１８天左右菌絲布滿培養(yǎng)基面，即得純菌絲母種。如有污染管應(yīng)及時(shí)棄除。

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２．原種擴(kuò)接

　　選?。保爸Ьz潔白、粗壯、生長整齊的試管種進(jìn)行原種的擴(kuò)接。另２０支純菌絲母種等做完出菇試驗(yàn)后再作留種及相關(guān)處理。一支試管種可接５瓶原種，每支試管接完要進(jìn)行火焰干熱滅菌后再擴(kuò)接另一支試管。接種完畢后取出菌種瓶放入２５℃左右恒溫箱培養(yǎng)，菌絲滿瓶后１０天左右進(jìn)行出菇試驗(yàn)。

３．出菇試驗(yàn)

　　用木屑７８％，麩皮２０％，過磷酸鈣２％做袋料培養(yǎng)基。一般接種１０～２０袋即可。接種后在適宜溫度下發(fā)菌，菌絲長滿后移到出菇最佳條件下進(jìn)行觀察。對菌絲生長速度快，吃料能力強(qiáng)，出菇早，朵形好，轉(zhuǎn)潮快，產(chǎn)量高，質(zhì)量好的平菇菌種可用于擴(kuò)大培養(yǎng)，投入栽培生產(chǎn)。