內(nèi)容搞要: 一、香菇原生質(zhì)體融合技術(shù)研究在香菇原生質(zhì)體制備，進(jìn)行了脫壁酶濃度及其組成、菌絲生理狀況、滲透壓穩(wěn)定劑、酶解溫度、PH、酶解時(shí)間、菌絲培養(yǎng)基成發(fā)等七種因子的比較試驗(yàn)，建立了制備香菇菌絲原生質(zhì)體的優(yōu)選條件，原生質(zhì)體產(chǎn)量達(dá)10^7個(gè)/ml以上純化后的原生質(zhì)體在以蔗糖為滲透壓穩(wěn)定劑和添加10%菌絲提取液的再生培養(yǎng)基上再生率大20%建立了以 PEG(30%Wt6000)促融劑的化學(xué)融合方法融合率達(dá)10^4―10^5根據(jù)四極性異綜合結(jié)合高等擔(dān)子菌的遺傳特性和單雙核原生質(zhì)體具有的不同特點(diǎn)建立了在香菇種內(nèi)和種間的原生質(zhì)體融合中，以單核體為親本融合形成雙核后以自然性狀標(biāo)記為主以同功酶拮抗反應(yīng)酶活性和出菇試驗(yàn)為輔的融合子鑒定方法，在香菇種內(nèi)原生質(zhì)體融合中以單核原生質(zhì)本為親本篩選出形成雙核體的融合子經(jīng)測(cè)定這些融合子與親本形在明顯的拮抗瓜的生化性狀差異，并在木屑代料培養(yǎng)基上發(fā)育成子實(shí)體。在香菇種間原生質(zhì)體融合中以香菇( 闊葉樹(shù)為生長(zhǎng)基質(zhì))和虎皮香菇(以針葉樹(shù)為基質(zhì))為親本構(gòu)建了32個(gè)種間融合子這些融合子與親本相比形成了新的特性:融合子雙核體菌絲無(wú)鎖狀聯(lián)合但能形成了實(shí)體對(duì)種間融合子進(jìn)行的生理生化及遺傳性狀的測(cè)定結(jié)果表明，在融合子中大部分出郵以虎皮香菇遺傳性狀為主的融合子類型但也有部分中間型在一些指標(biāo)中還出現(xiàn)超過(guò)雙親的性狀。二、原生質(zhì)體融合技術(shù)在香菇育種上的應(yīng)用選擇了不同生態(tài)型和基因型的香菇栽培種和野生種菌株為親本進(jìn)行了8個(gè)組合的香菇種內(nèi)原生質(zhì)體組合，建子27個(gè)香姑種內(nèi)融合子經(jīng)過(guò)兩年小區(qū)栽培試驗(yàn)和上海市香菇菌種考評(píng)試驗(yàn)，篩選出兩個(gè)具有優(yōu)良栽培性狀的融合子，它們分別比我國(guó)香菇主要栽培種7402增產(chǎn)24%和15%現(xiàn)已在上海和全國(guó)各省進(jìn)行中試。三、異綜結(jié)合食用菌的原生質(zhì)體單核化研究:根據(jù)食用菌菌絲體在帛備原生質(zhì)體時(shí)形成無(wú)核、單核和雙核三種類型原生質(zhì)體的現(xiàn)象，系統(tǒng)地研究了異綜結(jié)合食用菌的原生質(zhì)體單核化現(xiàn)象和遺傳規(guī)律通過(guò)技術(shù)上改進(jìn)，準(zhǔn)確穩(wěn)定地從不同異綜結(jié)合食用菌的雙核菌絲體中得到大量的單核原生質(zhì)體并測(cè)出了單核原生質(zhì)體的交配型，菌絲生長(zhǎng)速度纖維素酶活性等性狀通過(guò)研究得出⑴原生質(zhì)體單核化是異綜結(jié)合食用菌在原生質(zhì)體制備和再生中的一個(gè)普遍現(xiàn)象⑵單核原生質(zhì)體是沒(méi)有經(jīng)過(guò)減數(shù)分裂不同于孢子單核體的無(wú)性后代是研究食用菌遺傳性狀的重要材料這兩個(gè)結(jié)論。根據(jù)這一研究結(jié)果提出單核原生質(zhì)體在食用菌育種上應(yīng)用的理論。由于單核原生質(zhì)體是具有特殊遺傳背景的無(wú)性單核體，利用這一材料做為雜交育種的親本可以克服常規(guī)育種中很多的局限性具有廣闊的應(yīng)用前景。在建立香菇原生質(zhì)體制備、再生和融合的優(yōu)選條件基礎(chǔ)上，構(gòu)建了具有新遺傳特性的127個(gè)香菇種內(nèi)融合子和32個(gè)香菇與虎皮香菇的種間融合子。經(jīng)過(guò)兩年的多點(diǎn)栽培評(píng)比，結(jié)合遺傳變異分析和雜種優(yōu)勢(shì)的生理生化指標(biāo)測(cè)定，篩選出二個(gè)具有優(yōu)良栽培性狀的香菇種內(nèi)融合子香融1(農(nóng)1)和香融 2(農(nóng)2)，這兩個(gè)細(xì)胞工程菌株比我國(guó)香菇主栽培菌種7402分別增產(chǎn)24%和 15%，產(chǎn)量差異達(dá)顯著水平，并具有菇形好，菌肉厚等特點(diǎn)。大面積生產(chǎn)表明:“滬農(nóng)1號(hào)”每100kg段木產(chǎn)干菇2kg，比當(dāng)?shù)刂髟云贩N增產(chǎn)42.9%，花菇與厚菇率高出25～50%，符合出口標(biāo)準(zhǔn)的達(dá)80%以上，接種成活率為98%，在浙江和江西等省山區(qū)推廣應(yīng)用面積為2770萬(wàn)kg段木推廣程度16.8%，已統(tǒng)計(jì)到的社會(huì)效益分別比對(duì)照菌株和國(guó)內(nèi)代料主栽品種增產(chǎn) 38%和56%，該菌種適應(yīng)性廣，抗逆性強(qiáng)，大面積推廣5年持續(xù)高產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn)，菇形圓整，肉厚柄短，推廣面積8380.5萬(wàn)段，已統(tǒng)計(jì)到的社會(huì)效益達(dá)12500萬(wàn)元，88年創(chuàng)匯88萬(wàn)美元，以上兩菌與國(guó)內(nèi)同類菌種相比，具有優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)的明顯特點(diǎn)。聯(lián)系地址：上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌所郵政編碼：201106 電話：62418660-92 聯(lián)系人：黃渭蘋(píng)。獲獎(jiǎng)情況:一九九○年度上海市農(nóng)科院科技成果一等獎(jiǎng)一九九一年獲農(nóng)業(yè)部科技進(jìn)步二等獎(jiǎng)。