一、菌種培養(yǎng)基的滅菌 

　　培養(yǎng)基的滅菌是菌種生產(chǎn)成敗的關(guān)鍵，未經(jīng)滅菌的培養(yǎng)基中存在著大量的微生物，常常導(dǎo)致菌種污染，給生產(chǎn)造成損失，目前菇農(nóng)普遍采用的滅菌方法是常壓蒸氣滅菌。 

　　常壓蒸氣滅菌的常壓滅菌灶用磚砌成，選直徑110厘米的鐵鍋，用磚砌高100厘米、直徑120厘米的鍋筒，內(nèi)外用水泥抹光滑。 

　　培養(yǎng)基裝入滅菌鍋后，用較厚的塑料膜和麻袋片把鍋筒口包蓋住，用繩子捆綁結(jié)實(shí)，然后用旺火猛燒，在最短的時(shí)間內(nèi)將鍋燒開(kāi)。待塑料膜鼓氣后成饅頭狀時(shí)，說(shuō)明鍋已燒開(kāi)，滅菌從這時(shí)開(kāi)始計(jì)時(shí)，要持續(xù)8-10小時(shí)，確保滅菌徹底，一些菇農(nóng)往往在滅菌上麻痹大意，因雜菌污染嚴(yán)重導(dǎo)致制種失敗。常壓滅菌時(shí)要做到“三防止”，一要防止中途降溫，中途不得不得停火，如鍋內(nèi)達(dá)不到100℃，在規(guī)定時(shí)間內(nèi)則達(dá)不到滅菌的目的。二要防止燒干鍋，在滅菌之前鍋內(nèi)要加足水，在滅菌過(guò)程中，如果鍋內(nèi)水量不足，要及時(shí)從注水口注水。三要防止存在滅菌死角，如鍋底著火部位不均，鍋筒口處僅從一端漏氣等等都可能出現(xiàn)滅菌死角。 

　　二、接種與培養(yǎng) 

　　滅菌后的培養(yǎng)基可進(jìn)行接種，接種就是將菌種移植到培養(yǎng)基上。從事接種的操作人員，必須樹(shù)立嚴(yán)格的無(wú)菌觀念，使操作者和接種工具處于嚴(yán)格的無(wú)菌狀態(tài)。因此，必須對(duì)接種工具進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌，對(duì)操作環(huán)境進(jìn)行徹底消毒，操作者的手和衣著也要消毒，嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)程。接種時(shí)要在接種箱內(nèi)或接種室內(nèi)進(jìn)行。 

　　接種時(shí)，先將接種箱或接種室內(nèi)雜物清除干凈，用2%來(lái)蘇兒噴霧消毒。將待接種的培養(yǎng)基、菌種和所用工具放入接種箱或接種室工作臺(tái)上，用福爾馬林和高錳酸鉀熏蒸接種箱、接種室至少半個(gè)小時(shí)，用量是每立方米空間用5克高錳酸鉀，加10毫升甲醛，接種前用75%的酒精棉擦抹雙手、母種試管或原種瓶外表，然后點(diǎn)燃酒精燈，進(jìn)行操作。接種完畢，熄滅酒精燈，將已接種好的瓶或袋移至培養(yǎng)室培養(yǎng)。一般一支母種可擴(kuò)繁原種4-5瓶，一瓶原種可擴(kuò)繁栽培種40-50瓶或15-20袋。 

　　培養(yǎng)室要保持清潔并調(diào)好溫度、濕度和空氣、光照等環(huán)境條件，菌種培養(yǎng)的適宜溫度以20-25℃，空氣的相對(duì)濕度控制在60%左右為宜。發(fā)菌期間要求暗光發(fā)菌，培養(yǎng)室要始終保持通風(fēng)良好的環(huán)境條件，按此管理方法，菌種在40天左右就可長(zhǎng)滿瓶或袋。長(zhǎng)滿瓶（袋）的菌種如果不馬上使用，要放在0-10℃以下的環(huán)境中，可保藏1-3個(gè)月。