南開大學(xué)生物系 蔣谷人 劉安西 周愛蓮
日本國(guó)立癌中心研究所對(duì)扣擔(dān)子菌類抑瘤的有效成分作了較全面的報(bào)道,但對(duì)其抑瘤機(jī)理,各家報(bào)道不一,作者以津白一號(hào)(TAI)純系小鼠植入白發(fā)性肉瘤S79作為腫瘤模型,以研究香菇多糖、口菇多糖的抑瘤機(jī)理:
一、材料:
香菇福建產(chǎn),口菇張家口產(chǎn),津白1號(hào)純系小鼠、TAI帶瘤(S79)小鼠,其余試劑為AR級(jí)。
二、方法:
1 擔(dān)子菌多糖的提?。阂詿崴崛?,乙醇分級(jí)部分沉淀,鯨蠟基三甲基銨分級(jí)沉淀,蠟酸分級(jí)部分抽提純化而得。
2 瘤株移植:剖取皮下肉瘤,迅速稱量,以4倍的生理鹽水制成細(xì)胞懸液,于每只小鼠的腹股溝皮注入0.2ml的細(xì)胞懸液(約含6X106個(gè)細(xì)胞)。成活率100%。
3 腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的測(cè)定:于實(shí)驗(yàn)鼠和對(duì)照鼠的腹腔內(nèi)各注入0.2ml生理鹽水,數(shù)分鐘后將小鼠眼眶放血致死,抽取腹腔滲出液1ml,入入裝有少量肝素的試管內(nèi),并滴加雞紅細(xì)胞懸液0.1ml,混勻,放入兩片蓋片,于37℃下孵育30分鐘,取出晾干,甲醇固定,姬姆薩瑞氏染色。鏡檢100個(gè)巨噬細(xì)胞及其所吞噬的雞紅細(xì)胞數(shù),分別求出巨噬細(xì)胞吞有雞紅細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)(即吞噬率)和每人巨噬細(xì)胞內(nèi)的平均雞紅細(xì)胞數(shù)(即吞噬指數(shù))。
4 脾臟切片和鏡檢:脾臟固定于Bouin氏液24小時(shí),石蠟切片,厚度5μm,蘇木精伊紅染色。作組織學(xué)觀察。
三、結(jié)果:
1 擔(dān)子菌多糖的抑瘤作用與腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的關(guān)系:如表9,隨著抑瘤率的增加,腹腔巨噬細(xì)胞吞噬百分率和吞噬指數(shù)也相應(yīng)增高,二者呈正相關(guān)。
表9 藥物的抑瘤作用與腹腔巨噬細(xì)胞的激活
組別 鼠數(shù) 劑量
(mg/kg/日) 平均瘤重
(g)
抑瘤率
(%) 吞噬百分率
(%) P值 吞噬指數(shù) P值
對(duì)照組 7 2.862±1.593 58.00±12.14 1.248±0.314
香菇多糖 7 12×10 1.61±0.915 43.74 78.50±3.72 <0.01 2.212±0.166 <0.005
口菇多糖 8 12×10 2.515±1.81 12.12 74.00±4.65 <0.01 2.276±0.792 <0.005
2 擔(dān)子菌多糖的抑瘤作用與脾臟組織增長(zhǎng)分化的關(guān)系:如表10,隨抑瘤率增高,其脾重/體重百分比也相應(yīng)增高,由脾切片可見,脾中淋巴小結(jié)數(shù)增多,紅髓內(nèi)巨噬細(xì)胞增多,說明脾臟處于迅速地增長(zhǎng)和分化狀態(tài)。這是擔(dān)子菌多糖增強(qiáng)免疫機(jī)能抑瘤的又一證明。
表10 藥物的抑作用與脾臟的增長(zhǎng)、分化(x±SE)
組別 鼠數(shù) 劑量
(mg/kg/日) 平均瘤重
(g)
抑瘤率
(%) 脾重/體重
(%) 脾橫切片鏡檢
淋巴小結(jié)數(shù) P值 P值
對(duì)照組 7 0.1ml/只X10 2.862±1.593 0.803±0.236 14.80±2.17 153.4±27.9
香菇多糖 7 12×10 1.61±0.915 43.3 1.367±0.378 21.80±5.56 <0.025 183.9±49.78 <0.15
口菇多糖 8 12×10 2.515±1.81 12.2 0.936±0.269 23.00±5.76 <0.01 207.33±45.73 <0.025
四、討論
由以上實(shí)驗(yàn)可見,香菇多糖等抗腫瘤作用,表現(xiàn)了強(qiáng)烈的宿主介導(dǎo)性,不僅促使脾臟的增長(zhǎng)和分化,而且有人報(bào)道香菇多糖作為協(xié)助者T細(xì)胞的特異恢復(fù)劑和刺激劑,是目前世界上所知道的最強(qiáng)最好的物質(zhì)之一。