分裝培養(yǎng)基高壓滅菌一級(jí)菌種擴(kuò)管
在食用菌生產(chǎn)中,母種的培養(yǎng)是至關(guān)重要的一環(huán)。母種質(zhì)量的優(yōu)劣,直接影響到食用菌產(chǎn)量的高低和栽培的成敗。
制作培養(yǎng)基
先將新鮮無(wú)病害的馬鈴薯洗凈,去皮后切成小薄片,稱200克,加水1000毫升,煮沸20分鐘后過濾,其濾汁為馬鈴薯煮汁。然后在馬鈴薯煮汁中加瓊脂20克和蔗糖20克煮溶,后補(bǔ)足水至1000毫升,調(diào)節(jié)pH值在5.5~6。調(diào)好pH值后進(jìn)行分裝,一般將培養(yǎng)基裝至試管的1/4處,而后加蓋棉塞,再用牛皮紙將試管每10支捆成一捆。分裝時(shí),注意培養(yǎng)基不可沾在近試管口的壁上,以免日后生霉菌。分裝后要立即進(jìn)行高壓滅菌,不可過夜。
高壓滅菌
將用牛皮紙捆好的試管 (棉塞朝上)豎直放入高壓鍋內(nèi)進(jìn)行滅菌。在0.11兆帕壓力下維持30分鐘,即可達(dá)到滅菌目的。滅菌時(shí),放汽要充分,否則影響滅菌效果。開鍋取出試管后趁熱擺放,使培養(yǎng)基成斜面。試管的斜面以距棉塞3厘米為宜,斜面擺成后,不宜再擺動(dòng)。
一級(jí)菌種擴(kuò)管
擴(kuò)管要在無(wú)菌條件下進(jìn)行,先將擴(kuò)管工具、培養(yǎng)基及菌種放到擴(kuò)管箱內(nèi),然后按每立方米用高錳酸鉀5克、40%的甲醛溶液10毫升的量進(jìn)行熏蒸消毒30分鐘。擴(kuò)管方法:先將擴(kuò)管鏟在酒精燈火焰上灼燒消毒,然后拔掉母種管上的棉塞,鏟一塊米粒大的母種,在酒精燈火焰無(wú)菌區(qū)內(nèi)迅速送入菌種試管內(nèi)。擴(kuò)管后的母種培育10~15天即可投入生產(chǎn)。