培養(yǎng)基滅菌有物理法和化學(xué)法,其中較多使用、而且效果好、效果穩(wěn)定的是物理法的熱力滅菌法?,F(xiàn)介紹幾種常用的方法。
一、高壓蒸汽滅菌:要求有高壓蒸汽鍋,技術(shù)指標(biāo)最高溫達(dá)攝氏140度或2公斤/平方厘米壓力。物品在密閉容器內(nèi),水經(jīng)過(guò)加熱產(chǎn)生高壓蒸汽而提高溫度達(dá)到殺菌的目的。一般培養(yǎng)基可用攝氏121度保持20分鐘即可達(dá)到滅菌效果,已經(jīng)把菌絲營(yíng)養(yǎng)體、孢子、芽孢全部殺死。但如果基質(zhì)內(nèi)含有葡萄糖、馬鈴茨、豆芽汁、維生素等物質(zhì)則應(yīng)用攝氏115度保持20分鐘為宜,否則過(guò)高溫度會(huì)破壞營(yíng)養(yǎng)物,而產(chǎn)生有毒物質(zhì)不利于食用菌生長(zhǎng)。木屑、蔗渣、棉籽殼、麥粒、草料、糞干等物質(zhì)原來(lái)含菌量較大而且含水量較少,宜用攝氏129度保持12.5小時(shí)滅菌。
二、常壓蒸汽滅菌:物品在鍋內(nèi)以常壓蒸汽進(jìn)行滅菌。通常蒸汽溫度為攝氏95105度,因此滅菌的時(shí)間要求68小時(shí)才能達(dá)到效果。這種方法適合人力,燃料充足,未有能力購(gòu)置高壓蒸汽鍋的地方使用。這種方法對(duì)保持培養(yǎng)基的養(yǎng)分較好。
三、間歇性滅菌法:對(duì)不宜超過(guò)攝氏100度高溫的物品較好。培養(yǎng)基置鍋內(nèi)經(jīng)攝氏100度高溫蒸1小時(shí),殺死雜菌的營(yíng)養(yǎng)體,保溫在攝氏2530度24小時(shí),殘留的孢子萌發(fā)成營(yíng)養(yǎng)體。進(jìn)行第二次蒸煮1小時(shí),把萌發(fā)的孢子殺死。同法,進(jìn)行第三次蒸煮1小時(shí),保溫等做法,即可達(dá)到完全滅菌的效果。
四、過(guò)濾除菌:一些不耐高溫的物品經(jīng)過(guò)機(jī)械阻留的技術(shù)把雜菌除去。如血清、維生素、氨基酸等物多用此法除菌。要求設(shè)置抽濾瓶和空氣壓縮機(jī)才能進(jìn)行。
五、化學(xué)藥劑滅菌法:常用的化學(xué)劑有氯化汞、高錳酸鉀、漂白粉、福爾馬林、酒精等。在食用菌栽培中,這些化學(xué)劑的滅菌效果不穩(wěn)定,而且有些影響到產(chǎn)品的安全性,如氯化汞不宜用于食物,而多用于表面消毒或環(huán)境消毒。