3、空氣。蛹蟲草需要少量空氣。在子實(shí)體發(fā)生期要適當(dāng)通風(fēng),增加新鮮空氣。否則,二氧化碳積累過多,子座不能正常分化,影響生長發(fā)育。
4、酸堿度。蛹蟲草為偏酸性真菌,其菌絲生長發(fā)育最適pH為5.2~6.8。但在滅菌和培養(yǎng)過程中pH值要下降。所以在配制培養(yǎng)基時,應(yīng)調(diào)高pH值1~1.5,在配制培養(yǎng)基時可加0.1~0.2%的磷酸二氫鉀或磷酸氫二鉀等緩沖物質(zhì)。
5、育種。長期采用無性繁殖及多次轉(zhuǎn)管的蛹蟲草菌種,其母本基因容易變異,表現(xiàn)為出草畸形,質(zhì)量下降。因此,在生產(chǎn)中應(yīng)定期對蛹蟲草菌種進(jìn)行一次有性繁殖。具體做法是,選取高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、早熟的蛹蟲草子實(shí)體,用0.1%升汞溶液,或75%的酒精進(jìn)行表面消毒后,用無菌水清洗表面藥液,置于盛有綜合培養(yǎng)基容器上方懸空,在21~23℃下靜置培養(yǎng),待培養(yǎng)基表面出現(xiàn)星芒狀蟲草菌落時,在接種箱內(nèi)挑取單個或多個菌落置試管斜面培養(yǎng)基培養(yǎng)。待蛹蟲草菌絲布滿斜面后再提純。獲得的孢子母種須經(jīng)出草比較試驗后,選取優(yōu)質(zhì)蟲草子實(shí)體再進(jìn)行一次組織分離,經(jīng)篩選后方可用于轉(zhuǎn)擴(kuò)栽培種。
6、考種。將母種擴(kuò)大培養(yǎng)后,置米飯培養(yǎng)基上,于18~20℃下培養(yǎng)20~30天,觀察生長情況。若見有細(xì)菌或霉菌污染,應(yīng)對母種進(jìn)一步純化;若無雜菌污染,可繼續(xù)培養(yǎng),一個月后即有橙紅色子實(shí)體產(chǎn)生,說明母種可靠。
7、二級種子培養(yǎng)。將液體培養(yǎng)基分裝于500毫升三角瓶中,每瓶加培養(yǎng)液200毫升,用12層紗布外加一層牛皮紙封口。13~30分鐘滅菌后,將母種在無菌條件下用接種鉤接入三角瓶中,每支斜面可接10瓶以上。接種后于20℃搖床培養(yǎng)5天左右,待形成均勻小球后即可用于栽培種。值得注意的是:如果培養(yǎng)液變混,有兩種可能性,一是細(xì)菌污染應(yīng)予以淘汰;二是由于菌絲生長過分粘稠所致。若難以判斷,可進(jìn)行鏡檢。
8、采收與干制方法。蛹蟲草成熟的標(biāo)準(zhǔn)是子座頂端露出土面2~8厘米,呈橙黃色或棕紅色,子座上端有小小的突起物出現(xiàn)。這時可用鑷子或鏟子輕輕扒開料土采收。采收后的蛹蟲草子實(shí)體,用水洗凈泥沙雜質(zhì),在太陽下曬干或烘干,保持子座與蟲體完整,裝入塑料袋封存。