食用菌的菌種是用孢子或子實體組織、菌絲組織體萌發(fā)而成用來當(dāng)做播種材料的純菌絲,通常則是指進過人工培養(yǎng)的純菌絲體(摘自常明昌主編《食用菌栽培學(xué)》)。食用菌菌種的最初則是來源于對新鮮蘑菇子實體的分離,所以在食用菌的人工制種中,組織分離法成為食用菌制種的基本方法,組織分離法的理論依據(jù)是細胞的全能性,即任何細胞在適宜條件下都能發(fā)育成新個體。實際上,組織分離下的純菌絲體,存在被雜菌污染的可能。
食用菌菌種不純主要有兩個方面原因。一方面,嚴(yán)格無菌的菌種分離過程是相對的,絕對的無菌環(huán)境是相當(dāng)難得到的,這使分離下的菌種存在雜菌的可能;另一方面,盡管我們對分離蘑菇的子實體進行了表面消毒,并且取就中間的分生能力較強的部分,但是不同的蘑菇子實體依然還可能存在共生細菌。
菌種不純嚴(yán)重的影響了食用菌的生產(chǎn)。一方面將直接加大食用菌生產(chǎn)污染率,增加食用菌生產(chǎn)的成本,顯著影響食用菌栽培農(nóng)戶或食用菌生產(chǎn)企業(yè)的經(jīng)濟效益;另一方面,共生細菌的存在是造成食用菌栽培和生產(chǎn)重復(fù)率低的一個顯著因子,在食用菌第一、二個周期生產(chǎn)中,細菌處于劣勢共生體,隨著共生細菌對環(huán)境的適應(yīng)能力的提高,雜菌會成為與蘑菇爭奪袋料營養(yǎng)的主要對手,進而造成污染率升高,影響食用菌生產(chǎn)的可持續(xù)發(fā)展。
所以,菌種純化是食用菌菌種生產(chǎn)中必要的環(huán)節(jié)。我們進行菌種純化的主要要以下兩種方法。
1、對分離下的母種進行液體二次培養(yǎng)
將分離下的母種接種于裝有不添加瓊脂的PDA培養(yǎng)基的試管中,進行室溫培養(yǎng)3 d后檢查,如果培養(yǎng)液在搖晃下是清澈的,則說明是該菌種純的,可以用于食用菌生產(chǎn),如果在搖晃條件下培養(yǎng)液是渾濁的,則說明共生細菌是存在的,棄之不用。
2、對分離下的母種進行培養(yǎng)基分割培養(yǎng)
首先用3 mm厚的牛皮紙將培養(yǎng)皿隔成兩部分,兩邊各倒入PDA培養(yǎng)基,使培養(yǎng)基面剛好與紙相平,保證表面不能流通,然后將分離下的母種接到一邊,而通過氣生菌絲上到另一邊的菌絲為純菌絲體,可用于食用菌生產(chǎn)。
菌種制作工作是食用菌生產(chǎn)的源頭工作,只有純化的菌種才能取得食用菌的高效益生產(chǎn)。