一、菌種培養(yǎng)基的滅菌

　　培養(yǎng)基的滅菌是菌種生產(chǎn)成敗的關(guān)鍵，未經(jīng)滅菌的培養(yǎng)基中存在著大批的微生物，經(jīng)常導(dǎo)致菌種污染，給生產(chǎn)造成喪失，目前菇農(nóng)普遍采取的滅菌方法是常壓蒸氣滅菌。

　　常壓蒸氣滅菌的常壓滅菌灶用磚砌成，選直徑110厘米的鐵鍋，用磚砌高100厘米、直徑120厘米的鍋筒，內(nèi)外用水泥抹光滑。

　　培養(yǎng)基裝入滅菌鍋后，用較厚的塑料膜和麻袋片把鍋筒口包蓋住，用繩子捆縛鞏固，此后用旺火猛燒，在最短的時間內(nèi)將鍋燒開。待塑料膜鼓氣后成饅頭狀時，說明鍋已燒開，滅菌從這時開端計(jì)時，要延續(xù)8―10小時，確保滅菌徹底，一些菇農(nóng)經(jīng)常在滅菌上掉以輕心，因雜菌污染嚴(yán)重導(dǎo)致制種失敗。常壓滅菌時要做到“三避免”，一要避免中途降溫，中途不得不得?；穑珏亙?nèi)達(dá)不到100℃，在規(guī)定時間內(nèi)則達(dá)不到滅菌的目標(biāo)。二要避免燒干鍋，在滅菌之前鍋內(nèi)要加足水，在滅菌進(jìn)程中，如果鍋內(nèi)水量不足，要及時從注水口注水。三要避免存在滅菌死角，如鍋底著火部位不均，鍋筒口處僅從一端漏氣等等都可能涌現(xiàn)滅菌死角。

　　二、接種與培養(yǎng)

　　滅菌后的培養(yǎng)基可進(jìn)行接種，接種就是將菌種移植到培養(yǎng)基上。從事接種的操作人員，必須建立威嚴(yán)的無菌觀念，使操作者和接種工具處于威嚴(yán)的無菌情況。因此，必須對接種工具進(jìn)行威嚴(yán)的滅菌，對操作環(huán)境進(jìn)行徹底消毒，操作者的手和衣著也要消毒，威嚴(yán)遵守?zé)o菌操作規(guī)程。接種時要在接種箱內(nèi)或接種室內(nèi)進(jìn)行。

　　接種時，先將接種箱或接種室內(nèi)雜物消除干凈，用2%來蘇兒噴霧消毒。將待接種的培養(yǎng)基、菌種和所用工具放入接種箱或接種室工作臺上，用福爾馬林和高錳酸鉀熏蒸接種箱、接種室至少半個小時，用量是每立方米空間用5克高錳酸鉀，加10毫升甲醛，接種前用75%的酒精棉擦抹雙手、母種試管或原種瓶外表，此后點(diǎn)燃酒精燈，進(jìn)行操作。接種完畢，熄滅酒精燈，將已接種好的瓶或袋移至培養(yǎng)室培養(yǎng)。通常一支母種可擴(kuò)繁原種4―5瓶，一瓶原種可擴(kuò)繁栽培種40―50瓶或15―20袋。

　　培養(yǎng)室要維持干凈并調(diào)好溫度、濕度和空氣、光照等環(huán)境條件，菌種培養(yǎng)的適宜溫度以20―25℃，空氣的相對濕度節(jié)制在60%左右為宜。發(fā)菌期間懇求暗光發(fā)菌，培養(yǎng)室要始終維持通風(fēng)良好的環(huán)境條件，按此管理方法，菌種在40天左右就可長滿瓶或袋。長滿瓶（袋）的菌種如果不立刻使用，要放在0―10℃以下的環(huán)境中，可保藏1―3個月。