母種多用半合成培養(yǎng)基培養(yǎng)。母種的生產(chǎn)應(yīng)有一個計劃,即預(yù)計某一時期內(nèi)所用生產(chǎn)種的數(shù)量,從而確定母種生產(chǎn)的數(shù)量。母種第一代盡量多轉(zhuǎn)出斜面管,減少轉(zhuǎn)管的代次,避免造成菌絲生活力下降、出菇率低等現(xiàn)象。斜面管在攝氏4度冰箱可保存3個月,但最好在一個月內(nèi)使用。加石蠟油的斜面在攝氏4度時保藏時間可長些。母種擴(kuò)大生產(chǎn)前要經(jīng)嚴(yán)格檢查是否污染病蟲害、標(biāo)簽是否齊全,是否經(jīng)過出菇試驗(yàn)等全面考核才能進(jìn)行擴(kuò)大生產(chǎn)。第一次母種轉(zhuǎn)管,每管可轉(zhuǎn)出60-80管第二次母種。第二次母種一部分用于轉(zhuǎn)接原種使用,一部分保藏。同樣做法,一般母種經(jīng)3-4次代轉(zhuǎn)傳為好。
斜面母種轉(zhuǎn)管方法:轉(zhuǎn)管過程應(yīng)在無菌箱或無菌室進(jìn)行。工作人員、工作環(huán)境、一切器材要經(jīng)嚴(yán)格消毒或滅菌。接種前斜面試管用75%酒精抹擦,酒精燈旁用拿接種鏟的手的指間拔下棉塞向外夾著,火焰輕輕燒過管口才轉(zhuǎn)管,已滅菌后稍涼的接種鏟先在母種斜面上縱向切成2毫米寬的長條,再用接種鏟沿斜面的水平方向深約2-3毫米鏟離,然后用接種鋤將斜面橫向切成寬2毫米、長4毫米的小塊。用接種鏟把斜面前段約1厘米的部分除去,其余菌種逐一小塊接入空白斜面培養(yǎng)基內(nèi),菌種塊放在空白斜面的中部為好。把管口燒過,塞上棉塞。以上操作在無雜菌條件下進(jìn)行,稱為無菌操作。離開酒精燈,寫上標(biāo)簽。新接上的菌種立即進(jìn)行適溫培養(yǎng)。當(dāng)原菌絲塊的菌絲萌發(fā)新菌絲時,可將原來溫度調(diào)低攝氏2-3度,讓菌絲緩慢生長,會更強(qiáng)壯,更有生命力。至菌絲長滿斜面即為菌種成熟。