食用菌菌絲拮抗法是食用菌菌種區(qū)別性鑒定的一種初步方法,通常采用平板菌絲拮抗法,其操作較簡便,用時(shí)短。但不同種類食用菌的菌絲生長特性差異表現(xiàn)較大,帶來對拮抗表現(xiàn)(隆起、隔離、溝槽等)的感官尺度難以把握,需要相關(guān)的專業(yè)知識和經(jīng)驗(yàn)。為此筆者采用菌袋菌絲拮抗,效果明顯,操作簡單,判斷直觀。
方法:將待鑒定菌株制作培養(yǎng)成相同規(guī)格的菌袋(二級種、栽培種、栽培袋均可),在無菌操作下,把供試菌袋的同一頭用消毒小刀割去塑料袋并刮平料面,再將菌袋斷面兩兩貼緊對接用相適的套袋套好(保持菌袋緊貼而不錯(cuò)位)放于適宜環(huán)境下遮光培養(yǎng)。
區(qū)組:兩個(gè)菌株拮抗設(shè)三組,每個(gè)菌株各自對接為兩個(gè)對照組,菌株之間對接為測試組,每組3個(gè)重復(fù)。
鑒別:將各區(qū)組在適宜條件下培養(yǎng)15~30d(時(shí)間以單袋在相同條件下菌絲滿袋時(shí)間的一半),脫去塑料袋,觀察對照組與測試組菌袋接觸面外圍菌絲表現(xiàn),手握兩端輕掰菌袋查看接觸面是否斷開。若測試組接觸面外圍菌絲明顯隆起,有隔離溝槽,變色、萎縮、吐水珠,用手輕掰就分開,而對照組與此表現(xiàn)相反,可鑒定為不同菌株;若測試組與對照組表現(xiàn)完全一樣,可鑒定為同一菌株。
優(yōu)缺點(diǎn)分析:菌袋菌絲拮抗法,由于培養(yǎng)基質(zhì)較多,菌絲量較大,拮抗表現(xiàn)非常明顯,易于觀察判斷,同時(shí)可以使用外力檢測菌絲之間的融合程度,便于量化,使檢測更具科學(xué)性和準(zhǔn)確性。此拮抗法的缺點(diǎn)是耗時(shí)較長,不能制袋的菌株無法鑒別。