四、菌種制作ァ
1.母種制作ァ
雞腿蘑菌種主要采用組織分離法得到純菌種。雞腿蘑菌絲在PDA培養(yǎng)基(馬鈴薯200克,葡萄糖20克,瓊脂20克,加水至1 000毫升)上生長良好。在以下加富培養(yǎng)基或麥粒煎汁培養(yǎng)基上菌絲生長得更好。ァ
(1)馬鈴薯200克、葡萄糖20克、硫酸鎂1.5克、磷酸二氫鉀1.5克、磷酸氫二鉀1.5克、維生素B1 10毫克、瓊脂20克,加水至1 000毫升。ァ
(2)小麥200克,浸泡10小時(shí),煮30分鐘,濾汁,加葡萄糖20克、蛋白胨3克、硫酸鎂0.5克、磷酸二氫鉀1.0克、維生素B1 0.2克、瓊脂20克,加水至1 000毫升。ァ
(3)小麥250克,浸泡10小時(shí),煮30分鐘,濾汁,加馬鈴薯150克、葡萄糖20克、蛋白胨2克、硫酸鎂1.5克、磷酸二氫鉀1.5克、磷酸氫二鉀1.5克、維生素B1 10毫克、瓊脂20克,加水至1 000毫升。
菌絲最初白色,然后變成灰白色,培養(yǎng)基的顏色也隨之加深。在恒溫箱中,25℃條件下菌絲在7~10天可長滿斜面,最快的5~6天。ァ 2.原種制作ァ
采用稻草、棉籽殼、雜木屑三種原料為主制作培養(yǎng)基和用麥粒制作培養(yǎng)基。試驗(yàn)證明,雞腿蘑的菌絲在這幾種培養(yǎng)基上都可以正常生長,但在以麥粒和棉籽殼為主的培養(yǎng)基上生長最好。各種原種培養(yǎng)基的配方如下:ァ
(1)稻草培養(yǎng)基稻草(切段或粉碎)60%、麩皮25%、玉米粉8%、復(fù)合肥5%、糖1%、石灰1%。ァ
(2)棉籽殼培養(yǎng)基A棉籽殼90%、麩皮4.5%、玉米粉4.5%、石灰1%。ァ
(3)棉籽殼培養(yǎng)基B棉籽殼87.5%、麩皮10%、尿素0.5%、石灰2%。ァ
(4)棉籽殼培養(yǎng)基C棉籽殼78%、麩皮10%、玉米粉5%、復(fù)合肥5%、糖1%、石膏1%、維生素B1微量。ァ
(5)木屑培養(yǎng)基雜木屑75%、麩皮15%、玉米粉8%、糖1%、石膏粉1%、維生素B1微量。ァ
(6)麥粒培養(yǎng)基麥粒加水,浸泡10~15小時(shí),加1%石灰粉煮沸30分鐘(至無白心,而皮不破),稍晾后裝瓶。ァ
以上培養(yǎng)基的含水量均控制在60%~65%,所有培養(yǎng)基均保持自然pH值,按常規(guī)方法裝瓶,塞棉塞,常壓或高壓蒸汽滅菌。冷卻后,在無菌箱或無菌室中無菌操作接入母種,置于24~26℃的溫室或溫箱中培養(yǎng)。經(jīng)30~35天雞腿蘑菌絲就可以長滿全瓶。除固體菌種外,雞腿蘑的原種也可以用液體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),制成液體原種。在各母種培養(yǎng)基配方中取消瓊脂,即可作為液體培養(yǎng)基配方。ァ
雞腿蘑菌種的好壞對(duì)子實(shí)體的產(chǎn)量影響甚大,應(yīng)加以注意。菌株不同,菌絲的形態(tài)也不完全一樣。有的菌株起初是線狀的,后來逐漸產(chǎn)生氣生菌絲;有的菌株起初是棉絮狀,后來逐漸變成線狀,色澤為白色或灰白色。好的菌種利用培養(yǎng)料的能力強(qiáng),菌絲生長較快。ァ 3.栽培種制作ァ
(1)栽培種培養(yǎng)基ァ
①同上述原種培養(yǎng)基配方。ァ
②雜木屑78%、麩皮20%、碳酸鈣1%、蔗糖1%,料水比為1∶1.5,pH值自然。ァ
③蘑菇堆肥28%、木屑60%、麩皮12%,料水比1∶1.4~1.5,pH值自然。ァ
(2)制作方法栽培種的培養(yǎng)容器采用聚丙烯塑料薄膜袋(長34~36厘米,寬14~17厘米,厚度0.05~0.06厘米)。ァ
①具體操作。選用上述培養(yǎng)基配方,按要求把原輔材料備好,加水?dāng)嚢杈鶆颍缓笱b袋?! ?br />
裝袋時(shí)先抓2~3把培養(yǎng)料裝進(jìn)袋中,用手把袋底的邊角壓入袋內(nèi),并壓緊培養(yǎng)料使之成圓柱形,袋底平穩(wěn)能直立于地面。在袋中插入圓形木棒或直徑2~2.5厘米的試管,最好插到底,但應(yīng)避免刺破袋子,而后繼續(xù)邊裝料邊用手壓實(shí),裝至袋長的2/3(約500克干料),壓平表而,拔出木棒或試管。這樣預(yù)埋管(棒)再裝斜,拔出后留下的洞穴堅(jiān)固、在搬運(yùn)過程中不易堵塞,滅菌時(shí)蒸汽容易穿透培養(yǎng)料,滅菌能更徹底,而且接種時(shí)原種落入洞底,加速菌絲生長、縮短栽培種培養(yǎng)時(shí)間。培養(yǎng)料裝好后,將袋口及表面弄干凈,在袋口上套上硬塑料套環(huán)(內(nèi)徑3.5厘米,高3.5厘米),讓袋口薄膜從環(huán)內(nèi)通過,并向外順環(huán)壁朝下翻轉(zhuǎn),然后將袋口整平,塞上棉塞,進(jìn)鍋滅菌。為防止棉塞受潮,進(jìn)鍋后每層塑料袋上方都要蓋牛皮紙。以1.5公斤/平方厘米的蒸汽壓力滅菌1.5小時(shí),或常壓蒸汽滅菌8~10小時(shí),滅菌后取出冷卻。
②接種與培養(yǎng)。栽培種也應(yīng)在無菌箱或無菌室內(nèi)按無菌操作要求接種,然后與原種同樣條件進(jìn)行培養(yǎng)