近年來(lái)，金針菇工廠(chǎng)化栽培在各地迅速發(fā)展。在福建，采用再生法栽培模式，廠(chǎng)家都實(shí)行自行制作菌種。菌種生產(chǎn)程序通常分為母種、原種、栽培種3個(gè)層次，其制作過(guò)程包括培養(yǎng)基配制、接種、菌絲培養(yǎng)等。在制種過(guò)程中，培養(yǎng)基滅菌和接種操作等不規(guī)范都容易造成污染，掌握好菌種制作技術(shù)是控制污染的關(guān)鍵。筆者從事金針菇菌種生產(chǎn)已有多年，其污染率控制在2%以?xún)?nèi)，現(xiàn)將制作技術(shù)介紹如下。
1. 母種的制作
1.1 品種選擇
目前市場(chǎng)皆以純白色品種為主，宜選用抗病性強(qiáng)，產(chǎn)量高，朵型好，基部絨毛少的品種，如8801，8909等。
1.2 培養(yǎng)基配制
選用25×200mm試管做栽培容器。常用配方為：去皮馬鈴薯225g，葡萄糖20g，瓊脂20g，硫酸鎂0.5g，磷酸二氫鉀1g，蛋白胨0.75g，維生素B2兩片，水1000ml，酸堿度自然。將馬鈴薯切成條放入水中煮熟，用四層紗布過(guò)濾取汁。然后加入瓊脂，攪拌使之充分溶化，再加入其他藥品并攪拌至溶解，移入漏斗中，分裝到試管中，容量為管長(zhǎng)1／5，塞上棉花球。用手提高壓滅菌鍋滅菌，壓力0.05Mpa時(shí)排放冷空氣，在0.12～0.15MPa壓力下滅菌30min，降壓至0.05MPa以下，出鍋，排放斜面，斜面長(zhǎng)度占試管長(zhǎng)度2／3為宜，待冷卻凝固后方可使用。
1.3 轉(zhuǎn)管與培養(yǎng)
用甲醛10ml加高錳酸鉀5g熏蒸消毒30min，戴好口罩，戴上手套，用2～3%來(lái)蘇兒溶液擦洗消毒，然后入箱接種。將母種試管口火燎一下，接種針在75%酒精浸后火焰灼燒冷卻后，伸入試管切分斜面母種，使之成5×5mm的小塊；挑取一小塊帶培養(yǎng)基的母種，接入試管培養(yǎng)基斜面上，火燎管口，塞上棉花球。接種完畢后，放置于培養(yǎng)箱中，溫度為20℃，培養(yǎng)14～16d菌絲可布滿(mǎn)整個(gè)斜面。菌絲培養(yǎng)時(shí)應(yīng)做到天天查菌，及時(shí)剔除污染菌、可疑菌。
2. 原種的制作
2.1 培養(yǎng)基配制
栽培容器選用750ml玻璃瓶。配方：棉籽殼50%，麥麩24%，木屑、蔗渣共24%，輕質(zhì)碳酸鈣1%，玉米芯1%，含水量60%。棉籽殼在混合前拌水預(yù)濕，料全部混合攪拌好后裝瓶。將料填入瓶子，使之達(dá)到瓶肩，料面壓實(shí)、壓平，然后將瓶壁上的培養(yǎng)料用清水洗凈，豎置于周轉(zhuǎn)筐內(nèi)。用圓形木棒插入瓶?jī)?nèi)，沿瓶口旋轉(zhuǎn)，形成一個(gè)欲留孔穴，旋出木棒，塞上棉花球。用臥式高壓滅菌鍋滅菌，由鍋爐提供蒸汽。排放兩次冷空氣，0.15～0.18MPa壓力下滅菌3h，降壓、出鍋，冷卻至25℃以下方可接種。
2.2 接種與培養(yǎng)
母種用來(lái)蘇兒溶液擦洗后放置于接種箱內(nèi)，第一箱用甲醛加高錳酸鉀熏蒸消毒，從第二箱開(kāi)始及接下來(lái)的幾箱都可用氣霧消毒盒（劑）8～12 g消毒，消毒30min后方可接種。用接種針稍微刮掉斜面上的菌絲，將斜面母種分成六小塊；瓶口靠近火焰，用接種針把小塊的培養(yǎng)基再分成成一個(gè)小塊和一個(gè)大塊，并勾入菌瓶?jī)?nèi)，塞上棉花球。接種完畢后，進(jìn)行搖瓶，使小塊的掉入孔穴中，大塊的在培養(yǎng)料上面。放置于溫度為20℃菌種培養(yǎng)房中，培養(yǎng)25～30d菌絲可走滿(mǎn)整個(gè)菌瓶。
3. 栽培種的制作
3.1 培養(yǎng)基配制
栽培種采用17.5×40×5cm聚丙烯塑料袋。棉籽殼45%，麥麩30%，木屑、蔗渣共21%，輕質(zhì)碳酸鈣1%，過(guò)磷酸鈣1%，玉米芯2%，含水量65%。料攪拌好后進(jìn)行裝袋，將料填入袋子，用拇指和食指將料從袋底角塞入袋內(nèi)，插上圓形木棒，沿棒四周將袋內(nèi)料壓緊，填至袋內(nèi)料高14～15cm，旋出木棒，套上套環(huán)，塞上棉花球，豎置于周轉(zhuǎn)筐內(nèi)，移入常壓滅菌鍋灶進(jìn)行滅菌。壓力0.3t以上為宜，溫度升至 100℃以上保持13h以上。出爐，冷卻至25℃以下。
3.2 接種與培養(yǎng)
將已用來(lái)蘇兒溶液擦洗的原種放置于接種箱內(nèi)，消毒方法跟原種接種時(shí)的消毒方法一樣；接種鏟消毒，原種瓶口火燎，挖掉表面的老菌塊并攪碎瓶?jī)?nèi)的菌種，鏟2～3鏟菌種移入菌袋內(nèi)，塞上棉花球。接種完畢后，出箱，排放于培養(yǎng)庫(kù)。培養(yǎng)庫(kù)溫度控制在20℃左右，相對(duì)濕度維持在65～70%為宜，暗光培養(yǎng)，菌絲生長(zhǎng)后期每天適當(dāng)進(jìn)行通風(fēng)。菌絲基本長(zhǎng)滿(mǎn)菌袋后進(jìn)行催蕾，培養(yǎng)庫(kù)溫度降至16～14℃，每天適當(dāng)開(kāi)燈，約10～15天即可長(zhǎng)出針尖菇，待針尖菇布滿(mǎn)菌袋80%，長(zhǎng)度4～6cm左右應(yīng)及時(shí)開(kāi)袋，拔去套環(huán)和棉花球，刈掉料面以上的塑料袋膜，移至6～8℃的出菇房進(jìn)行培養(yǎng)。
4.金針菇母種的保藏
采用低溫保藏。把斜面長(zhǎng)滿(mǎn)菌絲的菌種放在4℃冰箱中，每隔3個(gè)月移植1次。轉(zhuǎn)管次數(shù)控制在10次以?xún)?nèi)，以免菌種生活力下降，影響菇的產(chǎn)量、質(zhì)量。
參考文獻(xiàn)（略）
1. 母種的制作
1.1 品種選擇
目前市場(chǎng)皆以純白色品種為主，宜選用抗病性強(qiáng)，產(chǎn)量高，朵型好，基部絨毛少的品種，如8801，8909等。
1.2 培養(yǎng)基配制
選用25×200mm試管做栽培容器。常用配方為：去皮馬鈴薯225g，葡萄糖20g，瓊脂20g，硫酸鎂0.5g，磷酸二氫鉀1g，蛋白胨0.75g，維生素B2兩片，水1000ml，酸堿度自然。將馬鈴薯切成條放入水中煮熟，用四層紗布過(guò)濾取汁。然后加入瓊脂，攪拌使之充分溶化，再加入其他藥品并攪拌至溶解，移入漏斗中，分裝到試管中，容量為管長(zhǎng)1／5，塞上棉花球。用手提高壓滅菌鍋滅菌，壓力0.05Mpa時(shí)排放冷空氣，在0.12～0.15MPa壓力下滅菌30min，降壓至0.05MPa以下，出鍋，排放斜面，斜面長(zhǎng)度占試管長(zhǎng)度2／3為宜，待冷卻凝固后方可使用。
1.3 轉(zhuǎn)管與培養(yǎng)
用甲醛10ml加高錳酸鉀5g熏蒸消毒30min，戴好口罩，戴上手套，用2～3%來(lái)蘇兒溶液擦洗消毒，然后入箱接種。將母種試管口火燎一下，接種針在75%酒精浸后火焰灼燒冷卻后，伸入試管切分斜面母種，使之成5×5mm的小塊；挑取一小塊帶培養(yǎng)基的母種，接入試管培養(yǎng)基斜面上，火燎管口，塞上棉花球。接種完畢后，放置于培養(yǎng)箱中，溫度為20℃，培養(yǎng)14～16d菌絲可布滿(mǎn)整個(gè)斜面。菌絲培養(yǎng)時(shí)應(yīng)做到天天查菌，及時(shí)剔除污染菌、可疑菌。
2. 原種的制作
2.1 培養(yǎng)基配制
栽培容器選用750ml玻璃瓶。配方：棉籽殼50%，麥麩24%，木屑、蔗渣共24%，輕質(zhì)碳酸鈣1%，玉米芯1%，含水量60%。棉籽殼在混合前拌水預(yù)濕，料全部混合攪拌好后裝瓶。將料填入瓶子，使之達(dá)到瓶肩，料面壓實(shí)、壓平，然后將瓶壁上的培養(yǎng)料用清水洗凈，豎置于周轉(zhuǎn)筐內(nèi)。用圓形木棒插入瓶?jī)?nèi)，沿瓶口旋轉(zhuǎn)，形成一個(gè)欲留孔穴，旋出木棒，塞上棉花球。用臥式高壓滅菌鍋滅菌，由鍋爐提供蒸汽。排放兩次冷空氣，0.15～0.18MPa壓力下滅菌3h，降壓、出鍋，冷卻至25℃以下方可接種。
2.2 接種與培養(yǎng)
母種用來(lái)蘇兒溶液擦洗后放置于接種箱內(nèi)，第一箱用甲醛加高錳酸鉀熏蒸消毒，從第二箱開(kāi)始及接下來(lái)的幾箱都可用氣霧消毒盒（劑）8～12 g消毒，消毒30min后方可接種。用接種針稍微刮掉斜面上的菌絲，將斜面母種分成六小塊；瓶口靠近火焰，用接種針把小塊的培養(yǎng)基再分成成一個(gè)小塊和一個(gè)大塊，并勾入菌瓶?jī)?nèi)，塞上棉花球。接種完畢后，進(jìn)行搖瓶，使小塊的掉入孔穴中，大塊的在培養(yǎng)料上面。放置于溫度為20℃菌種培養(yǎng)房中，培養(yǎng)25～30d菌絲可走滿(mǎn)整個(gè)菌瓶。
3. 栽培種的制作
3.1 培養(yǎng)基配制
栽培種采用17.5×40×5cm聚丙烯塑料袋。棉籽殼45%，麥麩30%，木屑、蔗渣共21%，輕質(zhì)碳酸鈣1%，過(guò)磷酸鈣1%，玉米芯2%，含水量65%。料攪拌好后進(jìn)行裝袋，將料填入袋子，用拇指和食指將料從袋底角塞入袋內(nèi)，插上圓形木棒，沿棒四周將袋內(nèi)料壓緊，填至袋內(nèi)料高14～15cm，旋出木棒，套上套環(huán)，塞上棉花球，豎置于周轉(zhuǎn)筐內(nèi)，移入常壓滅菌鍋灶進(jìn)行滅菌。壓力0.3t以上為宜，溫度升至 100℃以上保持13h以上。出爐，冷卻至25℃以下。
3.2 接種與培養(yǎng)
將已用來(lái)蘇兒溶液擦洗的原種放置于接種箱內(nèi)，消毒方法跟原種接種時(shí)的消毒方法一樣；接種鏟消毒，原種瓶口火燎，挖掉表面的老菌塊并攪碎瓶?jī)?nèi)的菌種，鏟2～3鏟菌種移入菌袋內(nèi)，塞上棉花球。接種完畢后，出箱，排放于培養(yǎng)庫(kù)。培養(yǎng)庫(kù)溫度控制在20℃左右，相對(duì)濕度維持在65～70%為宜，暗光培養(yǎng)，菌絲生長(zhǎng)后期每天適當(dāng)進(jìn)行通風(fēng)。菌絲基本長(zhǎng)滿(mǎn)菌袋后進(jìn)行催蕾，培養(yǎng)庫(kù)溫度降至16～14℃，每天適當(dāng)開(kāi)燈，約10～15天即可長(zhǎng)出針尖菇，待針尖菇布滿(mǎn)菌袋80%，長(zhǎng)度4～6cm左右應(yīng)及時(shí)開(kāi)袋，拔去套環(huán)和棉花球，刈掉料面以上的塑料袋膜，移至6～8℃的出菇房進(jìn)行培養(yǎng)。
4.金針菇母種的保藏
采用低溫保藏。把斜面長(zhǎng)滿(mǎn)菌絲的菌種放在4℃冰箱中，每隔3個(gè)月移植1次。轉(zhuǎn)管次數(shù)控制在10次以?xún)?nèi)，以免菌種生活力下降，影響菇的產(chǎn)量、質(zhì)量。
參考文獻(xiàn)（略）
