菌種的分離與篩選是在食用菌栽培過程中的重中之重。食用菌的菌種在使用過程中存在著變異與退化,尤其是草菇菌絲,生長快退化也快,因此要定期引種或提純復(fù)壯,才能保證菌種質(zhì)量及種性穩(wěn)定,從而為最終產(chǎn)量穩(wěn)定打下基礎(chǔ)。
1 組織分離
工廠化生產(chǎn)草菇時(shí),為了保證種性穩(wěn)定,大多采用定期組織分離、嚴(yán)格篩選,獲得菌種。一般每次選擇種菇時(shí),首先要選擇出菇好(產(chǎn)量高,整體菇形大小適中,整齊度高)的菇房,菇房內(nèi)無明顯病蟲害;其次在此菇房內(nèi)選擇出菇最好的床架,從該床架中挑選出菇最好的料層;在該料層上最好的一片菇中選擇無雜菌蟲害、生長健壯、非常結(jié)實(shí)、底盤肥大的草菇幼菇(五六分熟,呈小水蜜桃狀)3~4個(gè)。采下幼菇立即放入無菌或潔凈的塑料袋中,連同分離用的試管培養(yǎng)基帶到菌種室超凈工作臺(tái)。
組織分離時(shí),先用75%的消毒酒精消毒雙手和工具以及種菇表面(操作熟練者也可不消毒種菇表面),用充分灼燒的手術(shù)刀先在縱面上淺淺的環(huán)切一道(不要切破外菌幕),在種菇的基部從正中切開一個(gè)小口,用手捏種菇外部剝開菇蕾,在菇蓋與菇柄交界處用滅過菌冷卻后的手術(shù)刀淺切一個(gè)“田”字形,每個(gè)小塊3~4mm見方(盡量不要?jiǎng)澊┕饺庥|及菌褶),直接用刀將菌肉小塊接入試管培養(yǎng)基上,塞上棉塞。將菌肉小塊拍到試管底部,置于29~31℃環(huán)境培養(yǎng)。分離到的試管要達(dá)到24支左右,如因操作失誤而達(dá)不到此數(shù)量,要補(bǔ)充合格種菇再分離。
2 分離菌株的鑒定與篩選
2.1 初篩1
①一般分離培養(yǎng)3d左右菇肉上萌發(fā)出白色菌絲,此時(shí)挑出因操作不過關(guān)而導(dǎo)致斜面感染雜菌的試管,余下繼續(xù)培養(yǎng);
?、诖z長至2cm左右時(shí),觀察菌絲生長情況:a基內(nèi)菌絲整齊濃密,纖細(xì)有力呈銀灰色,生長速度快;氣生菌絲爬壁能力強(qiáng),長勢整齊一致的繼續(xù)培養(yǎng);b.基內(nèi)菌絲很稀疏,氣生菌絲長勢混亂,氣生菌絲發(fā)白,氣生菌絲遠(yuǎn)比基內(nèi)苗絲多或者感染雜菌,只要出現(xiàn)其中一種情況就剔除;
③觀察滿管快慢,標(biāo)注滿管時(shí)間;
?、苡^察厚垣孢子出現(xiàn)早晚,標(biāo)注時(shí)間;優(yōu)先選擇先滿管先出現(xiàn)厚垣孢子的試管,留最好的12株,不足則有多少留多少。
2.2 初篩2
?、賹⑹S嗟?2株編號(hào)VZl~VZ12,取尖端菌絲轉(zhuǎn)管,底部3cm不動(dòng),每支轉(zhuǎn)20~30支,對(duì)應(yīng)標(biāo)注VZlMI~VZ12M1;
?、谵D(zhuǎn)管后剩余的菌種,在酒精燈下,敲破試管底部 (可用小砂輪沿底部無培養(yǎng)基處用力劃出痕跡,然后在火焰上稍稍烤一下,如未破裂,迅速用冷的酒精棉球冷卻可使試管底部破裂),用滅過菌的打孔器在底部1~2cm位置打孔取樣(打孔器直徑4~5mm),打2排孔,每排2個(gè);靠基部的那排接到平板中央,另一排接到平板邊沿;菌絲面貼培養(yǎng)基,標(biāo)注與轉(zhuǎn)管試管相同,置于29~31℃倒置培養(yǎng);
③轉(zhuǎn)管試管的篩選方式與下述“草菇母種轉(zhuǎn)管篩選”相同;平板分2塊:接在中央的菌種,主要對(duì)比菌絲形態(tài),色澤、均一度,是否存在角變,淘汰不穩(wěn)定的菌株;接在邊沿的菌株,主要比較每組的平均生長速度,如果平板的蓋板無冷凝水的,比較其爬壁力;綜合評(píng)比后,篩選出最佳的8株。
2.3 復(fù) 篩
①待厚垣孢子出現(xiàn)后,將篩選出的8個(gè)菌株的試管置于20℃下避光保藏;
?、?株菌株挑最好的1~2個(gè)平板接原種,離接種塊2cm處打孔取樣,每個(gè)樣接1袋原種,菌絲面貼料面。每個(gè)菌株接30袋,29~31℃避光培養(yǎng),記錄其生長速度、觀測菌絲色澤及長勢(原種培養(yǎng)基須按配方精確稱量,嚴(yán)格控制料水比,拌料均勻,裝袋重量、高度、松緊度一致)。
?、酆Y選出表現(xiàn)最佳的4個(gè)菌株,每個(gè)菌株挑最好的20袋原種,5袋置于20℃避光保藏,15袋進(jìn)行出菇試驗(yàn)。
3 出菇試驗(yàn)
出菇試驗(yàn)對(duì)于所有食用菌的育種都是最關(guān)鍵的一步,通過出菇試驗(yàn)比較不同菌株之間的優(yōu)劣,篩選出不同菌株適合的生產(chǎn)模式。
草菇組織分離平板接原種的同時(shí),外來引種經(jīng)轉(zhuǎn)管篩選后的母種,每個(gè)菌株接30袋原種;當(dāng)厚垣孢子都出現(xiàn)后,每個(gè)菌株挑出較好的15袋做出菇試驗(yàn)。
①4個(gè)菌株加外來引種各 15袋,每個(gè)菌株每組5袋,3個(gè)重復(fù);
?、谘氐撞空劢歉钊ゴ?,袋口留2cm,多余割去,排在菇床架上;
?、蹏姵龉剿撼龉剿臏囟?、pH值與正常出菇水相同,總水量約為原種干重的30%,噴完出菇水后蓋無紡布進(jìn)入催蕾環(huán)節(jié);出菇水根據(jù)實(shí)際情況調(diào)節(jié),做到底部不滴水,寧少勿多,防止因水分過多造成大幅度減產(chǎn)。
?、艽呃偌俺龉焦芾砼c常規(guī)同,采收記重時(shí)記錄每組的采收時(shí)間和采收菇重,統(tǒng)計(jì)分析時(shí)每組剔除1袋最差的,其余統(tǒng)計(jì)分析比較平均生物轉(zhuǎn)化率、開始出菇時(shí)間和清床時(shí)間;保留生物轉(zhuǎn)化率最高、周期最短的2個(gè)菌株;淘汰的菌株對(duì)應(yīng)的保藏原種停止保藏,保留的2個(gè)菌株對(duì)應(yīng)的保藏原種在有效期內(nèi)輪流轉(zhuǎn)擴(kuò)栽培種投人生產(chǎn)。
4 草菇母種轉(zhuǎn)管篩選
轉(zhuǎn)管前要將種源在29~31℃的環(huán)境下培養(yǎng)24~48h,轉(zhuǎn)管時(shí)要做到空白斜面無冷凝水,接種塊大小一致,規(guī)格3mm×3mm~4mm×4mm,菌種塊直接掉到底部,不要在培養(yǎng)基上劃過,29~31℃環(huán)境下避光培養(yǎng)。
?、俳臃N后24h,觀察萌動(dòng)情況,正常12h萌動(dòng);
②接種后48h,觀察菌絲生長情況:a基內(nèi)菌絲整齊濃密,纖細(xì)有力呈銀灰色,生長速度快;氣生菌絲爬壁能力強(qiáng),長勢整齊一致的繼續(xù)培養(yǎng);b基內(nèi)菌絲很稀疏,氣生菌絲長勢混亂,氣生菌絲發(fā)白,氣生菌絲遠(yuǎn)比基內(nèi)菌絲多或者感染雜菌,出現(xiàn)其中一種情況要剔除;c相對(duì)a而言,生長速度略慢,標(biāo)注后對(duì)比培養(yǎng)(有些種塊在接種時(shí)燙傷而萌動(dòng)慢造成的,后期培養(yǎng)指標(biāo)合格可以使用);
③接種后72h,觀察氣生菌絲的爬壁能力,將爬壁能力較弱的剔除;
④接種后84~120h,正常菌絲滿管,比較檢查時(shí)要將培養(yǎng)不同天數(shù)滿管的標(biāo)注并分開(分成3類);培養(yǎng)144h未滿管的剔除;
?、萁臃N后156~240h,正常菌絲出現(xiàn)磚紅色厚垣孢子,每天檢查,出現(xiàn)厚垣孢子后,標(biāo)注出現(xiàn)日期,當(dāng)天放置到18~22℃環(huán)境避光保存(保藏時(shí)將不同天數(shù)滿管的分開放);培養(yǎng)240h未出現(xiàn)厚垣孢子的剔除。
注:斜面母種在30d有效保藏期內(nèi)使用的,對(duì)于同一批次同一品種的,優(yōu)先使用菌絲先長滿的;在菌絲同一天長滿的里面優(yōu)先使用先出現(xiàn)厚垣孢子的。
5 原種和栽培種的篩選
生產(chǎn)原種和栽培種之前,在接種前48h,取出保藏菌種置于29~31℃下恢復(fù)培養(yǎng)。
原種的篩選標(biāo)準(zhǔn):以生長速度、菌絲色澤和健壯程度、厚垣孢子出現(xiàn)早晚為基準(zhǔn);采用標(biāo)準(zhǔn)棉子殼配方29~31℃培養(yǎng),一般48~72h封面,8~10d長滿,12~15d出現(xiàn)厚垣孢子,10d內(nèi)未長滿的淘汰;菌絲纖細(xì)有力呈銀灰色的保留,菌絲變濃白或局部變濃白的的淘汰;由于配方以及含水量的不同,上述參數(shù)會(huì)有所不同,根據(jù)實(shí)際情況選擇菌絲外觀好生長速度快的原種,出現(xiàn)厚垣孢子早的更好。
栽培種的篩選與原種基本相同,差異在時(shí)間上,一般使用標(biāo)準(zhǔn)配方在29~31℃培養(yǎng),48h封面,7~10d長滿,11~14d出現(xiàn)厚垣孢子,10d內(nèi)未長滿的淘汰。
6 菌種保藏期限
草菇母種出現(xiàn)厚垣孢子之后立即置于18~22℃環(huán)境避光保藏,30d內(nèi)使用最佳,最長不超過60d,草菇原種出現(xiàn)厚垣孢子之后立即置于18~22℃環(huán)境避光保藏,20d內(nèi)使用;草菇栽培種出現(xiàn)厚垣孢子之后最好立即使用,18~22℃下保藏前3天效果最佳,最多存放7d。
注意事項(xiàng):
?、僭诓莨缴鲜褂玫脑嚬芘囵B(yǎng)基,要注意以下幾點(diǎn):
a.培養(yǎng)基在配制至分裝前,做到攪拌均勻,防止因試管內(nèi)營養(yǎng)差異影響對(duì)菌絲優(yōu)劣的判斷;
b.試管培養(yǎng)基滅菌后冷卻、擺斜面時(shí)要防止出現(xiàn)大量冷凝水,培養(yǎng)基溫度在55~60℃的時(shí)候出鍋,溫度過高冷凝水多,溫度過低容易凝固;斜面擺好后要立刻覆蓋一些潔凈的保溫材料,防止凝固時(shí)產(chǎn)生大量冷凝水;如果少量定型的斜面存在冷凝水,應(yīng)剔除;如果大多數(shù)試管都產(chǎn)生冷凝水,可在較密閉的干凈箱體內(nèi)放置干燥劑(如生石灰塊)對(duì)試管進(jìn)行干燥,待斜面上冷凝水除去后立即停止干燥。
?、陔H準(zhǔn)草菇菌種配方:棉子殼84%,麩皮12%,輕質(zhì)碳酸鈣2%,生石灰2%,料水比1∶1;滅菌后pH≤6.0。根據(jù)棉子殼的質(zhì)量優(yōu)劣,酌情添加1%蔗糖。
?、壑芷诘陌才牛涸诟鱾€(gè)環(huán)節(jié)都穩(wěn)定的情況下,一般組織分離、出菇試驗(yàn)90d做一次,如果出現(xiàn)高產(chǎn)菇房,立即做組織分離和出菇試驗(yàn)。一次組織分離到出菇試驗(yàn)結(jié)束需要40d,每次接試管到出現(xiàn)厚垣孢子需要7~10d,每次轉(zhuǎn)管出現(xiàn)厚垣孢子保藏20d需要進(jìn)行下1次轉(zhuǎn)管(每次轉(zhuǎn)管的盡量在保藏1個(gè)月內(nèi)使用),允許轉(zhuǎn)管3次。
1 組織分離
工廠化生產(chǎn)草菇時(shí),為了保證種性穩(wěn)定,大多采用定期組織分離、嚴(yán)格篩選,獲得菌種。一般每次選擇種菇時(shí),首先要選擇出菇好(產(chǎn)量高,整體菇形大小適中,整齊度高)的菇房,菇房內(nèi)無明顯病蟲害;其次在此菇房內(nèi)選擇出菇最好的床架,從該床架中挑選出菇最好的料層;在該料層上最好的一片菇中選擇無雜菌蟲害、生長健壯、非常結(jié)實(shí)、底盤肥大的草菇幼菇(五六分熟,呈小水蜜桃狀)3~4個(gè)。采下幼菇立即放入無菌或潔凈的塑料袋中,連同分離用的試管培養(yǎng)基帶到菌種室超凈工作臺(tái)。
組織分離時(shí),先用75%的消毒酒精消毒雙手和工具以及種菇表面(操作熟練者也可不消毒種菇表面),用充分灼燒的手術(shù)刀先在縱面上淺淺的環(huán)切一道(不要切破外菌幕),在種菇的基部從正中切開一個(gè)小口,用手捏種菇外部剝開菇蕾,在菇蓋與菇柄交界處用滅過菌冷卻后的手術(shù)刀淺切一個(gè)“田”字形,每個(gè)小塊3~4mm見方(盡量不要?jiǎng)澊┕饺庥|及菌褶),直接用刀將菌肉小塊接入試管培養(yǎng)基上,塞上棉塞。將菌肉小塊拍到試管底部,置于29~31℃環(huán)境培養(yǎng)。分離到的試管要達(dá)到24支左右,如因操作失誤而達(dá)不到此數(shù)量,要補(bǔ)充合格種菇再分離。
2 分離菌株的鑒定與篩選
2.1 初篩1
①一般分離培養(yǎng)3d左右菇肉上萌發(fā)出白色菌絲,此時(shí)挑出因操作不過關(guān)而導(dǎo)致斜面感染雜菌的試管,余下繼續(xù)培養(yǎng);
?、诖z長至2cm左右時(shí),觀察菌絲生長情況:a基內(nèi)菌絲整齊濃密,纖細(xì)有力呈銀灰色,生長速度快;氣生菌絲爬壁能力強(qiáng),長勢整齊一致的繼續(xù)培養(yǎng);b.基內(nèi)菌絲很稀疏,氣生菌絲長勢混亂,氣生菌絲發(fā)白,氣生菌絲遠(yuǎn)比基內(nèi)苗絲多或者感染雜菌,只要出現(xiàn)其中一種情況就剔除;
③觀察滿管快慢,標(biāo)注滿管時(shí)間;
?、苡^察厚垣孢子出現(xiàn)早晚,標(biāo)注時(shí)間;優(yōu)先選擇先滿管先出現(xiàn)厚垣孢子的試管,留最好的12株,不足則有多少留多少。
2.2 初篩2
?、賹⑹S嗟?2株編號(hào)VZl~VZ12,取尖端菌絲轉(zhuǎn)管,底部3cm不動(dòng),每支轉(zhuǎn)20~30支,對(duì)應(yīng)標(biāo)注VZlMI~VZ12M1;
?、谵D(zhuǎn)管后剩余的菌種,在酒精燈下,敲破試管底部 (可用小砂輪沿底部無培養(yǎng)基處用力劃出痕跡,然后在火焰上稍稍烤一下,如未破裂,迅速用冷的酒精棉球冷卻可使試管底部破裂),用滅過菌的打孔器在底部1~2cm位置打孔取樣(打孔器直徑4~5mm),打2排孔,每排2個(gè);靠基部的那排接到平板中央,另一排接到平板邊沿;菌絲面貼培養(yǎng)基,標(biāo)注與轉(zhuǎn)管試管相同,置于29~31℃倒置培養(yǎng);
③轉(zhuǎn)管試管的篩選方式與下述“草菇母種轉(zhuǎn)管篩選”相同;平板分2塊:接在中央的菌種,主要對(duì)比菌絲形態(tài),色澤、均一度,是否存在角變,淘汰不穩(wěn)定的菌株;接在邊沿的菌株,主要比較每組的平均生長速度,如果平板的蓋板無冷凝水的,比較其爬壁力;綜合評(píng)比后,篩選出最佳的8株。
2.3 復(fù) 篩
①待厚垣孢子出現(xiàn)后,將篩選出的8個(gè)菌株的試管置于20℃下避光保藏;
?、?株菌株挑最好的1~2個(gè)平板接原種,離接種塊2cm處打孔取樣,每個(gè)樣接1袋原種,菌絲面貼料面。每個(gè)菌株接30袋,29~31℃避光培養(yǎng),記錄其生長速度、觀測菌絲色澤及長勢(原種培養(yǎng)基須按配方精確稱量,嚴(yán)格控制料水比,拌料均勻,裝袋重量、高度、松緊度一致)。
?、酆Y選出表現(xiàn)最佳的4個(gè)菌株,每個(gè)菌株挑最好的20袋原種,5袋置于20℃避光保藏,15袋進(jìn)行出菇試驗(yàn)。
3 出菇試驗(yàn)
出菇試驗(yàn)對(duì)于所有食用菌的育種都是最關(guān)鍵的一步,通過出菇試驗(yàn)比較不同菌株之間的優(yōu)劣,篩選出不同菌株適合的生產(chǎn)模式。
草菇組織分離平板接原種的同時(shí),外來引種經(jīng)轉(zhuǎn)管篩選后的母種,每個(gè)菌株接30袋原種;當(dāng)厚垣孢子都出現(xiàn)后,每個(gè)菌株挑出較好的15袋做出菇試驗(yàn)。
①4個(gè)菌株加外來引種各 15袋,每個(gè)菌株每組5袋,3個(gè)重復(fù);
?、谘氐撞空劢歉钊ゴ?,袋口留2cm,多余割去,排在菇床架上;
?、蹏姵龉剿撼龉剿臏囟?、pH值與正常出菇水相同,總水量約為原種干重的30%,噴完出菇水后蓋無紡布進(jìn)入催蕾環(huán)節(jié);出菇水根據(jù)實(shí)際情況調(diào)節(jié),做到底部不滴水,寧少勿多,防止因水分過多造成大幅度減產(chǎn)。
?、艽呃偌俺龉焦芾砼c常規(guī)同,采收記重時(shí)記錄每組的采收時(shí)間和采收菇重,統(tǒng)計(jì)分析時(shí)每組剔除1袋最差的,其余統(tǒng)計(jì)分析比較平均生物轉(zhuǎn)化率、開始出菇時(shí)間和清床時(shí)間;保留生物轉(zhuǎn)化率最高、周期最短的2個(gè)菌株;淘汰的菌株對(duì)應(yīng)的保藏原種停止保藏,保留的2個(gè)菌株對(duì)應(yīng)的保藏原種在有效期內(nèi)輪流轉(zhuǎn)擴(kuò)栽培種投人生產(chǎn)。
4 草菇母種轉(zhuǎn)管篩選
轉(zhuǎn)管前要將種源在29~31℃的環(huán)境下培養(yǎng)24~48h,轉(zhuǎn)管時(shí)要做到空白斜面無冷凝水,接種塊大小一致,規(guī)格3mm×3mm~4mm×4mm,菌種塊直接掉到底部,不要在培養(yǎng)基上劃過,29~31℃環(huán)境下避光培養(yǎng)。
?、俳臃N后24h,觀察萌動(dòng)情況,正常12h萌動(dòng);
②接種后48h,觀察菌絲生長情況:a基內(nèi)菌絲整齊濃密,纖細(xì)有力呈銀灰色,生長速度快;氣生菌絲爬壁能力強(qiáng),長勢整齊一致的繼續(xù)培養(yǎng);b基內(nèi)菌絲很稀疏,氣生菌絲長勢混亂,氣生菌絲發(fā)白,氣生菌絲遠(yuǎn)比基內(nèi)菌絲多或者感染雜菌,出現(xiàn)其中一種情況要剔除;c相對(duì)a而言,生長速度略慢,標(biāo)注后對(duì)比培養(yǎng)(有些種塊在接種時(shí)燙傷而萌動(dòng)慢造成的,后期培養(yǎng)指標(biāo)合格可以使用);
③接種后72h,觀察氣生菌絲的爬壁能力,將爬壁能力較弱的剔除;
④接種后84~120h,正常菌絲滿管,比較檢查時(shí)要將培養(yǎng)不同天數(shù)滿管的標(biāo)注并分開(分成3類);培養(yǎng)144h未滿管的剔除;
?、萁臃N后156~240h,正常菌絲出現(xiàn)磚紅色厚垣孢子,每天檢查,出現(xiàn)厚垣孢子后,標(biāo)注出現(xiàn)日期,當(dāng)天放置到18~22℃環(huán)境避光保存(保藏時(shí)將不同天數(shù)滿管的分開放);培養(yǎng)240h未出現(xiàn)厚垣孢子的剔除。
注:斜面母種在30d有效保藏期內(nèi)使用的,對(duì)于同一批次同一品種的,優(yōu)先使用菌絲先長滿的;在菌絲同一天長滿的里面優(yōu)先使用先出現(xiàn)厚垣孢子的。
5 原種和栽培種的篩選
生產(chǎn)原種和栽培種之前,在接種前48h,取出保藏菌種置于29~31℃下恢復(fù)培養(yǎng)。
原種的篩選標(biāo)準(zhǔn):以生長速度、菌絲色澤和健壯程度、厚垣孢子出現(xiàn)早晚為基準(zhǔn);采用標(biāo)準(zhǔn)棉子殼配方29~31℃培養(yǎng),一般48~72h封面,8~10d長滿,12~15d出現(xiàn)厚垣孢子,10d內(nèi)未長滿的淘汰;菌絲纖細(xì)有力呈銀灰色的保留,菌絲變濃白或局部變濃白的的淘汰;由于配方以及含水量的不同,上述參數(shù)會(huì)有所不同,根據(jù)實(shí)際情況選擇菌絲外觀好生長速度快的原種,出現(xiàn)厚垣孢子早的更好。
栽培種的篩選與原種基本相同,差異在時(shí)間上,一般使用標(biāo)準(zhǔn)配方在29~31℃培養(yǎng),48h封面,7~10d長滿,11~14d出現(xiàn)厚垣孢子,10d內(nèi)未長滿的淘汰。
6 菌種保藏期限
草菇母種出現(xiàn)厚垣孢子之后立即置于18~22℃環(huán)境避光保藏,30d內(nèi)使用最佳,最長不超過60d,草菇原種出現(xiàn)厚垣孢子之后立即置于18~22℃環(huán)境避光保藏,20d內(nèi)使用;草菇栽培種出現(xiàn)厚垣孢子之后最好立即使用,18~22℃下保藏前3天效果最佳,最多存放7d。
注意事項(xiàng):
?、僭诓莨缴鲜褂玫脑嚬芘囵B(yǎng)基,要注意以下幾點(diǎn):
a.培養(yǎng)基在配制至分裝前,做到攪拌均勻,防止因試管內(nèi)營養(yǎng)差異影響對(duì)菌絲優(yōu)劣的判斷;
b.試管培養(yǎng)基滅菌后冷卻、擺斜面時(shí)要防止出現(xiàn)大量冷凝水,培養(yǎng)基溫度在55~60℃的時(shí)候出鍋,溫度過高冷凝水多,溫度過低容易凝固;斜面擺好后要立刻覆蓋一些潔凈的保溫材料,防止凝固時(shí)產(chǎn)生大量冷凝水;如果少量定型的斜面存在冷凝水,應(yīng)剔除;如果大多數(shù)試管都產(chǎn)生冷凝水,可在較密閉的干凈箱體內(nèi)放置干燥劑(如生石灰塊)對(duì)試管進(jìn)行干燥,待斜面上冷凝水除去后立即停止干燥。
?、陔H準(zhǔn)草菇菌種配方:棉子殼84%,麩皮12%,輕質(zhì)碳酸鈣2%,生石灰2%,料水比1∶1;滅菌后pH≤6.0。根據(jù)棉子殼的質(zhì)量優(yōu)劣,酌情添加1%蔗糖。
?、壑芷诘陌才牛涸诟鱾€(gè)環(huán)節(jié)都穩(wěn)定的情況下,一般組織分離、出菇試驗(yàn)90d做一次,如果出現(xiàn)高產(chǎn)菇房,立即做組織分離和出菇試驗(yàn)。一次組織分離到出菇試驗(yàn)結(jié)束需要40d,每次接試管到出現(xiàn)厚垣孢子需要7~10d,每次轉(zhuǎn)管出現(xiàn)厚垣孢子保藏20d需要進(jìn)行下1次轉(zhuǎn)管(每次轉(zhuǎn)管的盡量在保藏1個(gè)月內(nèi)使用),允許轉(zhuǎn)管3次。